斑馬魚三碘甲狀腺原氨酸(T3)酶聯(lián)免疫分析
試劑盒使用說明書
本試劑僅供研究使用 目的:本試劑盒用于測定斑馬魚血清,血漿及相關(guān)液體樣本中三碘甲狀腺原氨酸(T3)的含量。
實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中斑馬魚三碘甲狀腺原氨酸(T3)水平。用純化的斑馬魚三碘甲狀腺原氨酸(T3)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入三碘甲狀腺原氨酸(T3)抗原,再與HRP標記的三碘甲狀腺原氨酸(T3)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的三碘甲狀腺原氨酸(T3)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中斑馬魚三碘甲狀腺原氨酸(T3)濃度。
試劑盒組成:
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1個 | 1個 | |
酶標包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標準品:27pmol/L | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶標試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
終止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
濃縮洗滌液 | (20ml×20倍)×1瓶 | (20ml×30倍)×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟:
1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在第一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在第一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從第一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為18pmol/L,12pmol/L ,6pmol/L,3pmol/L,1.5pmol/L)。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3. 各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
計算:
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,
在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD
值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋
倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值
代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋
倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
(此圖僅供參考)
試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。
2.批內(nèi)與批見應分別小于9%和11%
檢測范圍:
1pmol/L -20pmol/L
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月
高壓無刷無環(huán)起動器WSQ3曙光專利產(chǎn)品 產(chǎn)品優(yōu)點 無刷無環(huán)起動器把傳統(tǒng)的、繁瑣的、多觸點元件組成的起動裝置去掉,采用無刷無環(huán)運行,操作簡單,安裝拆卸方便,可大大減少維修費用,其優(yōu)點是:去掉滑環(huán)、碳刷、刷盒、刷盒支架、短路環(huán)及二次回路系統(tǒng)中的頻敏變阻器、交流接觸器、時間繼電器等元件,并可保持電機原有的運行特性。 主要技術(shù)參數(shù) 額定頻率:50Hz 額定電壓:380V 配用電機功率:15-130KW a.輕載:0.6Me≤M≤0.8Me 、2.5Ie |
9寸VGA觸摸屏 液晶顯示器
高亮度數(shù)字屏
3H-2000A型快速比表面分析儀參數(shù)規(guī)格 : |
3H-2000A型快速比表面分析儀主要優(yōu)點: |
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產(chǎn)
西安驪創(chuàng)電子科技有限公司長期熱銷熱線:18392112387聯(lián)系人:王俊杰工作長期在線QQ:2498574022 傳真:高壓并聯(lián)電容器 結(jié)構(gòu)
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●產(chǎn)品技術(shù)性能符合GB3983-89、GB/T11024-2001《高低壓并聯(lián)電容器》國家標準及lEC871-1(1987)要求。西安驪創(chuàng)電子科技有限公司是一家集產(chǎn)品研發(fā)、制造服務為一體的高科技企業(yè)。專業(yè)生產(chǎn)高壓電容器、電抗器、變壓器,電力電容器,高壓電阻器等。公司生產(chǎn)設備先進,檢測試驗設備齊全,科研力量雄厚,擁有強大的研發(fā)實力和生產(chǎn)能力,有一支高素質(zhì)的員工隊伍,產(chǎn)品在吸收國內(nèi)外先進技術(shù)的基礎上,通過嚴謹?shù)馁|(zhì)量體系管理,結(jié)合本公司的特色工藝和工裝,在產(chǎn)品開發(fā)上不斷完善、不斷創(chuàng)新,可根據(jù)用戶的特殊要求設計和生產(chǎn)。產(chǎn)品性能均達到國家和行業(yè)標準,營銷全國各地,深受用戶的好評
公司堅持以人為本,強化管理,誠信經(jīng)營,走品牌創(chuàng)新之路。電抗器類產(chǎn)品有:高低壓空心鐵心串聯(lián)電抗器、限流電抗器、啟動電抗器、平波電抗器、三相交流電抗器、中頻平波電抗器、輸入輸出電抗器,濾波器,電阻,制動單元等;變壓器類產(chǎn)品有:各類單相及三相干式變壓器、 QZB系列自耦變壓器、TSB調(diào)N線系列變壓器、BK系列控制變壓器、隔離變壓器、中頻變壓器、整流變壓器等、點焊機專用變壓器等。電力電容器類產(chǎn)品有:高低壓并聯(lián)電力電容器、濾波電容器、電熱電容器、防護電容器、電容式電壓互感器、高壓測量用標準電容器、電容分壓器,高低壓電容補償裝置及諧波治理裝置、無功功率自動補償控制器。
TF130熱式渦街流量計是在漩渦發(fā)生體上,采用Sailsors獨自開發(fā)的熱式流速傳感器,對渦街頻率進行檢測,是目前進的具有寬測量比特長的氣體專用熱式渦街流量計. TF130熱式渦街流量計中采用一體化溫度、壓力補償結(jié)構(gòu).不需要再單獨加溫度、壓力補償,漩渦發(fā)生體采用了硅基微機械加工技術(shù)、薄膜成型技術(shù)制作的熱式流速傳感器,實現(xiàn)了100:1的寬量程比.標準配備有LCD顯示功能、模擬輸出(4-20mA)、脈沖輸出、瞬時流量、累積流量;另外還配置了RS-485通訊功能. | |
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3351、3051、1151DP/GP型帶遠傳裝置的差壓/壓力變送器,可避免被測介質(zhì)直接和變送器的隔離膜片接觸,它適用于下面幾種情況: 被測介質(zhì)對變送器頭和敏感元件有腐蝕作用時; 需要將高溫被測介質(zhì)與變送器隔離時; 被測介質(zhì)中有固體懸浮物或高粘度易堵塞變送器頭和壓力容器時; 被測介質(zhì)用引壓管引出易固化或結(jié)晶時; 更換被測介質(zhì)需要沖洗而不容交混時; 必須保持衛(wèi)生條件,防止污染時。