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人胸腎表達趨化因子（BRAK/CXCL14）ELISA試劑盒

使用目的：     為定量（性）測定活化的目標濃度的血清，血漿，組織勻漿，細胞培養(yǎng)上清及其他生物液體。研究使用不是用于診斷或治療程序。     如果你有任何問題，請聯(lián)系上海義森生物科技有限公司。

實驗原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被目標物抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標物呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。 樣本處理及要求1. 血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于2000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8℃ 2000g離心30分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：2000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。注：標本溶血會影響最后檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。Elisa Biotech生產(chǎn)的各項指標elisa試劑盒的檢測范圍適中。經(jīng)過大量正常標本檢驗，標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內，因此，實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當有部分樣本值超過最大標準品濃度時，可用樣本稀釋液將標本進行適當稀釋后再進行實驗。 需要而未提供的試劑和器材1. 酶標儀（450nm）2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒溫箱人胸腎表達趨化因子（BRAK/CXCL14）ELISA試劑盒

試劑盒組成 名稱 96孔配置 48孔配置 備注 微孔酶標板 12孔×8條 12孔×4條 無 標準品 0.5mL*6管 0.5mL*6管 按說明書復溶 樣本稀釋液 10mL 10mL 無 檢測抗體-HRP 10mL 5mL 無 20×洗滌緩沖液 25mL 15mL 按說明書稀釋 底物A 6mL 3mL 無 底物B 6mL 3mL 無 終止液 6mL 3mL 無 封板膜 2張 2張 無 說明書 1份 1份 無 自封袋 1個 1個 無

人胸腎表達趨化因子（BRAK/CXCL14）ELISA試劑盒

注意事項1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。2. 洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。3. 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍的底物液不能使用。5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。9. 不能使用過期產(chǎn)品。10. 如果可能傳播疾病，所有的樣品都應管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。 試劑準備試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡后方可使用。1. 標準品復溶：試劑盒提供6管標準品，每管已標定濃度，并且凍干。實驗前在每個標準品管中加入0.5mL樣本稀釋液，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動助其溶解，使其恢復為每個標準品管身標注的濃度。2. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。 操作步驟1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；3. 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板4-5次（也可用洗板機洗板）。6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7. 每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。 實驗結果計算以所測標準品的OD值為橫坐標，標準品的濃度值為縱坐標，在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線，并得到直線回歸方程，將樣品的OD值