1. 技術(shù)原理與實驗流程
1.1遺傳位標(biāo)的選擇
45個SNP位點在小鼠基因組上的分布如圖1所示,針對各SNP位點側(cè)翼進行引物和探針設(shè)計。
圖1 48個SNP位點在小鼠基因組上的分布
1.2技術(shù)原理--高通量PCR-LDR分型
高溫連接酶檢測反應(yīng)技術(shù)是一種成熟的SNP分型檢測方法。其原理是高溫連接酶檢測到模板DNA與兩條探針DNA的接頭處存在著堿基錯配,則連接反應(yīng)不能進行,如圖2所示。針對這45 SNP位點,將其分成4組(圖1中a,b,c,d),每組進行多重PCR-LDR分型。
1.3實驗流程
實驗流程見圖3
2實驗結(jié)果及分析
2.1測序儀檢測結(jié)果
PCR-LDR 產(chǎn)物測序儀檢測結(jié)果如圖4,從圖中可見,分型信號清晰唯一,無雜信號的干擾。此外,對部分位點經(jīng)sanger測序驗證,分型準(zhǔn)確度為100%。

圖4:測序儀檢測結(jié)果(第二組為例)
2.2遺傳質(zhì)量檢測的有效率
對10個近交系小鼠的3批樣本(共66個)進行檢測,結(jié)果顯示,不同來源的相同品系SNP狀態(tài)完全一致。45個SNP位點全出的概率為100%。表明這套方案對于實驗中的樣本45個SNP位點完全有效。同時所測樣本在這些位點處基因型均為純合,驗證了這十個常見近交系小鼠品系為純系。
十個品系間兩兩進行位點差異比較(共45對),最大差異位點數(shù)為29個,最小位點差異數(shù)7個;平均差異位點個數(shù)為19,差異位點數(shù)中值為20(圖5)。由此可見45個SNP位點在這十個常見近交系小鼠品系中的鑒定效率較高。
圖5 任意兩個品系差異等位基因數(shù)目的分布圖
3 服務(wù)流程
3.1 標(biāo)準(zhǔn)服務(wù)流程
1)客戶溝通,確認(rèn)檢測小鼠品系以及樣本數(shù),提示實驗可行性。
2) 建立實驗方案,并在此過程中和客戶保持密切溝通。
3) 大規(guī)模實驗,有嚴(yán)格的指控流程保證實驗結(jié)果可靠
3.2 實驗數(shù)據(jù)質(zhì)量控制流程
1) 所有分型信號要求信號清晰唯一,排除不確定信號干擾。
2) 每板數(shù)據(jù)中都有陰性對照,質(zhì)控PCR和LDR污染數(shù)據(jù)。
3) 整個實驗服務(wù)流程有15%的雙盲重復(fù)對照,保證數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠。
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一、產(chǎn)品概述
定性分析實驗原理:本試劑盒采用雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定標(biāo)本中抗乙型肝炎病毒e抗體(HBeAb)。用純化的抗乙型肝炎病毒e抗體(HBeAb)抗原包被微孔板,制成固相抗原,可與樣品中抗乙型肝炎病毒e抗體(HBeAb)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后再與HRP標(biāo)記的抗乙型肝炎病毒e抗體(HBeAb)抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中抗乙型肝炎病毒e抗體(HBeAb)的存在與否。
·小鼠肌紅蛋白(MYO/MB)酶標(biāo)法分析編號:ARB12968 英文名稱:Mouse myoglobin,myo/mb ELISA KIT·小鼠抑制素A(INH-A)含量分析編號:ARB12981 英文名稱:Mouse inhibin,inh-a ELISA KIT·大鼠蛋白激酶C(PKC)Elisa分析編號:ARB12618 英文名稱:Rat protein kinase c,pkc ELISA KIT·人肌酸激酶(CK)elisa檢測編號:ARB10699 英文名稱:Human creatine kinase,ck ELISA KIT·人囊蟲病抗體(CYT Ab)酶聯(lián)免疫定量檢測編號:ARB11924 英文名稱:Human cysticercosis antybody,cyt ab ELISA KIT·人β防御素2(HBD-2)Elisa方法檢測編號:ARB10216 英文名稱:Human β defensin 2, hbd2 ELISA KIT·小鼠催乳素(PRL)定量分析編號:ARB13262 英文名稱:Mouse prolactin,prl ELISA KIT·豬藍耳病毒酶標(biāo)法分析編號:ARB13991 英文名稱:anti-prrsv ELISA KIT·人25羥基維生素D(25-OH-D)血清中含量檢測編號:ARB10015 英文名稱:Human 25-dihydroxy vitamin d, 25-oh-d ELISA KIT
ARB12202 大鼠孕酮(P)檢測服務(wù) Rat progesterone ELISA KITBL0923 RBITC標(biāo)記羊抗人纖維蛋白原抗體ARB10050 人Apelin 13(AP13)含量測試 Human apelin 13,ap13 ELISA KIT001003 綿羊血清ARB13486 雞促黃體激素(LH)elisa測定使用說明書 Chicken luteinizing hormone,lh ELISA KITARB13919 豬免疫球蛋白M(IgM)elisa檢測 Porcine immunoglobulin m,IgM ELISA KITARB13774 豚鼠(NPC1L1)ELISA代測服務(wù) 環(huán)丙沙星 Pyrogallic acid 85721-33-1甘露低聚糖 γ-Linolenic acidARB10654 人血管生成素樣蛋白3(ANGPTL3)elisa檢測說明書 Human angiopoietin-like protein 3,angptl3 ELISA KITBTN60807 柱式無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNAOUT Column Endo-free Plasmid DNAOUT磺胺噻唑 OTAC 72-14-0HC0311 Biohit大容量電動移液器ARB12866 小鼠甘油三酯(TG)elisa檢測操作說明書 人抗乙型肝炎病毒e抗體(HBeAb)ELISA試劑盒訂貨說明:1)賣方確保所訂產(chǎn)品與目錄技術(shù)指標(biāo)保持一致;2)為了確保買方產(chǎn)品在運輸中的質(zhì)量,對有特殊要求的低溫產(chǎn)品予以濕冰運輸。3)收到貨物后如出現(xiàn)質(zhì)量問題,買方需在收到貨物一個月內(nèi)向賣方提出書面異議。買方逾期不提出異議,視為貨物符合其要求,賣方不付任何責(zé)任。
北京百奧萊博科技有限公司生產(chǎn)的人抗乙型肝炎病毒e抗體(HBeAb)ELISA試劑盒技術(shù)原理:(1)抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。(2)結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。(3)酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。(4)受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。(5)此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。(6)加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復(fù)性好。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。