技術(shù)參數(shù)
WA-COD 用的是試劑 COD套裝(化學(xué)需氧量) 型號WA-COD 測定原理 堿性高錳酸鉀氧化法 測定范圍 (高濃度用)0/10/100/1000/10000 mg/l (低濃度用)0/2/4/6/8/10 mg/l 標(biāo)準(zhǔn)配置 測定試劑2種(50次),中和劑,標(biāo)準(zhǔn)比色卡,器具一套(三角燒瓶,墊板,量筒,剪刀,溫度計,燒杯) Palintest COD 試管檢測 Test 量程(mg/l) COD/150試劑/無汞 5-150mg/l COD/400試劑/無汞 20-400mg/l COD/2000試劑/無汞 50-2000mg/l COD/20000試劑/無汞 500-20000mg/l COD/150/M試劑/含硫酸汞 5-150mg/l COD/400/M試劑/含硫酸汞 20-400mg/l COD/2000/M試劑/含硫酸汞500-20000mg/l COD/20000/M試劑/含硫酸汞5-150mg/l COD/150/2M試劑/高氯化物50-2000mg/l COD/2000/2M試劑/高氯化物0-25mg/l Fe COD/20000試劑/高氯化物500-20000mg/l
主要技術(shù)指標(biāo)
L5P-14設(shè)備 | ||
接口 | 比特率 | 2048±50ppm |
碼 型 | HDB3碼 | |
輸入阻抗 | 75Ω(不平衡接口)、120Ω(平衡接口)可選 | |
壓縮率 | 符合ITU的G.711中的A律 | |
幀結(jié)構(gòu) | 符合ITU的G.704、G.706 | |
電源 | A型 | -48VDC |
工作環(huán)境 | 溫度 | 0°C ~ 45°C |
濕度 | 90 %(非凝結(jié)) | |
功耗 | <75W(滿配) | |
機箱尺寸 | 482mm(長)×354mm(高)×335mm(深) |
機器類別 | Exceed-E | ||||
機器型號 | Exceed-E-UV | Exceed-E-UP | |||
進水水源 | 蒸餾水、去離子水或純凈水 水溫5—40℃ TDS﹤5ppm 電導(dǎo)率﹤10μS/cm TOC﹤30ppb | ||||
電 源 | 220V/50HZ | ||||
功 率 | 30W | ||||
機器重量 | 30㎏ | ||||
主機體積 | 長410mm×寬345mm×高440mm | ||||
水質(zhì)檢測顯示配置 | 配置雙路雙傳感器水質(zhì)檢測顯示儀,檢測顯示進水電導(dǎo)率和超純水電阻率 | ||||
源水桶配置 | 配置25L全自動PE源水桶 | ||||
超濾膜配置 | 0.05μm,分子截流量5000dalton | 孔徑0.1μm,分子截流量8000dalton孔徑 | |||
取水口終端微濾 | 原裝德國進口0.2um囊式微濾(選配) | ||||
UV配置 | 配置185nm和254nm雙波長紫外消解儀 | 無 | |||
制水量 | 每分鐘1.5L | ||||
取水流速 | 每分鐘2L/min | ||||
超純水水質(zhì) | 電導(dǎo)率 | 電導(dǎo)率≤0.055μS/cm@25℃; | |||
電阻率 | 電阻率18.3ΜΩ·cm@25℃ | ||||
微粒子 | (大于0.05μm)含量:﹤1/ml | (大于0.10μm)含量:﹤1/ml | |||
熱 源 | ﹤0.001Eu/ml | ﹤0.01Eu/ml | |||
微生物 | ﹤1cfu/ml | ||||
總有機碳量 | TOC:1-3ppb | TOC:﹤5ppb | |||
金屬陽離子含量 | Fe(鐵) ﹤0.005 Cu(銅) ﹤0.005 Al(鋁) ﹤0.005 Ni(鎳) ﹤0.005 Zn(鋅) ﹤0.02 Cr(鉻) ﹤0.005 Na(鈉) ﹤0.01 K(鉀) ﹤0.02 | ||||
陰離子含量 | Clˉ(氯) ﹤0.01 NO2ˉ(亞硝酸根) ﹤0.02 NO3ˉ (硝酸根) ﹤0.02 SO4²ˉ (硫酸根) ﹤0.01 | ||||
達到標(biāo)準(zhǔn) | 中國分析實驗室用水規(guī)格(GB6682-2000)一級水標(biāo)準(zhǔn) 美國試藥級(CAP、ASTM、NCCLS)超純水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn) 中國國家電子級超純水規(guī)格(GB/T11446.1-1997)EW-I標(biāo)準(zhǔn) | ||||
處理單元配置 | MF→DI→UP→UV→UF→(MF選配) | MF→DI→UP→UF→(MF選配) | |||
適用范圍 | 基因研究、分子生物學(xué)、生命科學(xué)、組織培養(yǎng)、生物工程、動植物細(xì)胞培養(yǎng)、氨基酸分析、蛋白質(zhì)純化、毒理研究、IVF實驗、DNA測序、ICP-MS、GC-MS、LC-MS、ICP、HPLC、GC、AAS、PCR、TOC等各類研究和高精密分析實驗用水 | 理化檢測分析、生化分析、血液分析、微量分析、環(huán)境分析、藥物成分分析、ICP-MS、GC-MS、LC-MS、ICP、HPLC、GC、AAS、PCR、TOC等各行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)實驗室研究、分析、檢測用水 |
高對比度 FSTN 顯示屏- TAB結(jié)構(gòu) - 4級灰度- S6B0741 控制器- 率白LED 背光- 單3.3V 供電- 與單片機接口(串/并)- 尺寸: 63.8x47.4x7.3MAX(t)
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聯(lián)系人:張莉 聯(lián)系電話: 13872666005
一、X熒光光譜儀工作原理 X射線發(fā)生器放出的X射線與樣品中元素的原子相互作用,逐出原子內(nèi)層電子。當(dāng)外層電子補充內(nèi)層電子時,會放射該原子所固有能量的X射線-特征X射線。根據(jù)受激后退激過程中所放出的特征X射線能量各不相同,依此進行定性分析;根據(jù)特征X射線強度大小,可進行定量分析。
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FC204,F(xiàn)A2104SN,F(xiàn)A2204B ,F(xiàn)A1004N,F(xiàn)A1104N,F(xiàn)C104
型號 | JA2603B |
稱量范圍 | 0-260g |
讀數(shù)精度 | 1mg |
秤盤尺寸 | Φ110mm |
外型尺寸 | 324mm×217mm×335mm |
凈重 | 7Kg |
電源/功率 | 220V/50Hz±1Hz |
型號 | JA5003B |
稱量范圍 | 0-500g |
讀數(shù)精度 | 1mg |
秤盤尺寸 | Φ110mm |
外型尺寸 | 350mm×210mm×346mm |
凈重 | 6.8Kg |
電源/功率 | AC 100~240V 50/60Hz 12W |
JA-B系列電子精密天平
功能
特點
◆自動校正
◆全透明設(shè)計
◆積分時間可調(diào)
◆稱量范圍更大
◆靈敏度可調(diào)
◆電源外置
◆懸掛稱量
◆背光智能控制,讀數(shù)清晰
◆故障報警
◆液晶大字體顯示
◆累計稱量
◆去皮重
◆稱量單位轉(zhuǎn)換(克,克拉,盎司)
◆計數(shù)功能
◆打印功能
◆RS232C,標(biāo)準(zhǔn)輸出接口
上海志榮是中國最大的{電子天平}制造企業(yè). 電子地磅 , 電子汽車衡 , 電子秤 , 電子天平 ,電子吊秤 ,電子稱 (歡迎訪問公司網(wǎng)站:http://www.zhirong17.com/)
提供{電子天平}可靠的質(zhì)量,良好的信譽,完善的服務(wù)!公司生產(chǎn)的{電子天平}品質(zhì),技術(shù)及服務(wù)受用戶信賴,行銷海內(nèi)外,贏得了良好的口碑.
全自動C型鋼機機器采用國標(biāo)350H鋼焊接而成,(如有需要可定做)。軸徑80mm,模具材質(zhì)9cr2m,堅硬耐磨,可保7000噸。中板18mm厚。雙面換套簡單操作。驅(qū)動電機11KW,每分鐘8—10米。切割可選裝飛鋸與扭斷,飛鋸切割11KW,扭斷切割油泵7.5KW。
C型鋼設(shè)備是一套軋輥可生產(chǎn)多種規(guī)格C型檁條成品的單卷成型機組。該機主要由被動裝料架、整平裝置、沖孔裝置、成型后切斷裝置、液壓站、電腦控制系統(tǒng)等。本機采用自動飛鋸沖孔,操作簡便等特點。
C型鋼壓瓦機制造它的壁厚可以制得很薄,而且大大簡化了生產(chǎn)工藝,提高生產(chǎn)效率?梢陨a(chǎn)用一般熱軋方法難以生產(chǎn)的壁厚均勻但截 面形狀復(fù)雜的各種型材和不同材質(zhì)的冷彎型鋼。
C型鋼機主要由被動放料架、放料架底座、進料導(dǎo)入平臺、整平裝置、成型主機、沖孔裝置、成型切斷裝置、液壓站、電腦控制柜等幾部分組成。
C型鋼設(shè)備技術(shù)參數(shù)
1、 生產(chǎn)型號:80-300
2、 電機功率:11千瓦
3、 模具材質(zhì)為軸承鋼
4、 大架采用350H鋼
5、 單機總長度為8m 寬度為2.2m 高度為1.1m
6、 總重量 7.3T左右
7、 全自動電腦控制系統(tǒng)
8、壓制材料厚度1-3.5mm
9、12排成型,上二下三校平,8道壓輥。
CMEH 2012第十一屆中國(北京)醫(yī)療器械展覽會 The11th China (BeiJing) Medical Devices Exhibition 2012時間:2012年9月26日—28日 地點:北京•中國國際展覽中心【提要】由北京市衛(wèi)生局、北京醫(yī)學(xué)會、上海展亞展覽服務(wù)有限公司共同籌辦CMEH北京展將于2012年9月26日—28日在北京•中國國際展覽中心隆重舉行。CMEH被行業(yè)協(xié)會評為2012年中國參展價值的行業(yè)展會稱號,望各單位積極報名參與!厩把浴 具國內(nèi)權(quán)威行業(yè)人士分析認(rèn)為,中國醫(yī)療器械行業(yè)市場潛力巨大且正處在整合發(fā)展臨界點,十二五期間將大力支持國產(chǎn)醫(yī)療器械發(fā)展,實施集中招標(biāo)采購時優(yōu)先采購國產(chǎn)醫(yī)療器械。同時也為國內(nèi)醫(yī)療器械行業(yè)市場奠定基礎(chǔ)。?北京是中國的首都,時刻走在醫(yī)療器械行業(yè)的前端,是提高我國醫(yī)療器械行業(yè)在廣大用戶和同行中的地位有舉足輕重的影響,促進我國醫(yī)療器械行業(yè)在國際市場的競爭和發(fā)展,具有十分重要的歷史意義。作為規(guī)模及影響力的醫(yī)療器械領(lǐng)域盛會 ,CMEH北京展將整合資源為國內(nèi)外醫(yī)療器械廠商提供一個既能做出口也能做國內(nèi)貿(mào)易的平臺展會,同期將邀請政府部門、醫(yī)院、教授、專家、學(xué)者、廠商舉辦30多場新產(chǎn)品技術(shù)和進出口貿(mào)易采購、法律法規(guī)交流研討會。CMEH已成功舉辦了十屆。展覽會規(guī)模逐年擴大,參展廠商不斷增加,每年吸引數(shù)萬名海內(nèi)外醫(yī)療器械行業(yè)的經(jīng)銷商、代理商、研究機構(gòu)、政府部門、醫(yī)院采購和管理部門等專業(yè)人士前來參觀。·組織機構(gòu) CMEH 2012批準(zhǔn)單位/主辦單位:北京市衛(wèi)生局 / 北京醫(yī)學(xué)會(中華醫(yī)學(xué)會北京分會)協(xié) 辦 單 位: 北京醫(yī)學(xué)會放射學(xué)分會 北京醫(yī)學(xué)會影像技術(shù)分會 北京醫(yī)學(xué)會腫瘤學(xué)分會 北京醫(yī)學(xué)會麻北京醫(yī)學(xué)會醉學(xué)分會 北京醫(yī)學(xué)會心電圖學(xué)分會 北京醫(yī)學(xué)會醫(yī)院后勤管理學(xué)分會國內(nèi)外支持單位:中國醫(yī)療器械協(xié)會 北京醫(yī)療器械協(xié)會 浙江醫(yī)療器械協(xié)會 江蘇醫(yī)療器械協(xié)會 河北醫(yī)療器械協(xié)會 廣東醫(yī)療器械協(xié)會美國醫(yī)療器械制造商協(xié)會 天津醫(yī)療器械協(xié)會香港醫(yī)療及保健器材行業(yè)協(xié)會 臺灣醫(yī)療繼續(xù)教育推廣學(xué)會 組織承辦單位:上海展亞展覽服務(wù)有限公司 展覽會是最直接、最的營銷手段之一,在同一時間、地點使醫(yī)療器械行業(yè)的供應(yīng)商和采購商集中到一起,參加CMEH您將有機會與30000多名觀眾面對面的洽談,CMEH 2012你值得參與。·為什么要參加 CMEH 2012供應(yīng)商可以:★ 通過“CMEH展”低成本結(jié)識、接觸到高質(zhì)量的采購商,成為眾多潛在的國外采購商的供應(yīng)商;★ 通過“CMEH展”可以與采購商進行面對面溝通,直接了解采購商的需求、戰(zhàn)略以及采購動向;★ 通過“CMEH展”把自己的聯(lián)絡(luò)方式及企業(yè)文化傳遞到參會的采購商,是一個成本的銷售機會;供應(yīng)商還可以:現(xiàn)場達成交易:展覽的時間雖然短,但由于直接與商家進行面對面的會談,便于達成協(xié)議或意向。搜索潛在客戶:3天的展覽,30000多觀眾;將助您接觸到新的潛在客戶。企業(yè)及產(chǎn)品宣傳:展覽會是一種立體的廣告,增進采購商對產(chǎn)品、服務(wù)的了解,宜于接受。樹立企業(yè)形象:在同行業(yè)和用戶領(lǐng)域樹立好的企業(yè)形象、提升行業(yè)地位。加深市場了解:在與采購商交流中了解市場的需求和潛力。比日常的市場調(diào)研要直觀和。開發(fā)市場、建立營銷渠道:利用參加展覽會開發(fā)市場和尋找客戶;物色代理商或合資伙伴。拓寬國際視野:達成國際合作的平臺,使產(chǎn)品和企業(yè)更的走向國際化。供需關(guān)系互動:會上聚集著您以往客戶或供貨單位,可方便于您在此進行互動與答謝活動。學(xué)習(xí)發(fā)展經(jīng)驗:與其他的供應(yīng)商相比較,了解別人的企業(yè)發(fā)展經(jīng)驗。·日程安排 CMEH 2012報到布展:2012年9月24日--25日 開幕式:2012年9月26日(9:00—9:30)展 覽:2012年9月26日—28日 撤 展:2012年9月28日下午·展會概況 CMEH 2012CMEH北京展將與北京市衛(wèi)生局、北京醫(yī)學(xué)會強強聯(lián)手共同打造全國性豪華醫(yī)療器械展陣容。CMEH是一個有十年歷史醫(yī)療展,十年的發(fā)展鑄就了一個時代的輝煌。此次與北京市衛(wèi)生局、北京醫(yī)學(xué)會合作,CMEH將拿出十年的辦展經(jīng)驗邀請客戶參加,在2011年10月初已與美國、德國、英國、意大利、瑞典、法國、比利時、迪拜、日本、韓國駐華大使和參贊已達成共識,將CMEH北京展發(fā)布在該國權(quán)威的網(wǎng)站上邀請客戶參加。 由北京市衛(wèi)生局發(fā)函給北京市所有醫(yī)院、醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)到會觀摩,并邀請全國各省市衛(wèi)生廳、衛(wèi)生局組織醫(yī)院前來參觀; 北京醫(yī)學(xué)會將組織全國及北京三甲醫(yī)院知名院士、教授、專家召開高新技術(shù)學(xué)術(shù)論壇會議和研討會,題目涉及醫(yī)療行業(yè)各個科室,將邀請醫(yī)院的院長、主任、醫(yī)師到會! 商機無限——聚焦北京,國內(nèi)外采購商云集,國際強勢將彰顯,醫(yī)療器械行業(yè)平臺;◆ 技術(shù)薈萃——國內(nèi)外產(chǎn)品及成果薈萃,展會-論壇-經(jīng)貿(mào)合作,是宣傳及市場開拓的平臺;◆ 展示的產(chǎn)品和技術(shù),樹立和鞏固公司形象;◆ 從各應(yīng)用行業(yè)的技術(shù)及采購代表獲取價值的市場反饋信息;◆ 為參展商提供一個示范產(chǎn)品及調(diào)查市場的機會,為買家提供一個知識平臺;◆ 把握與來自行業(yè)研究機構(gòu)、組織團體以及政府官員接觸的寶貴機會;◆ 從一系列高水準(zhǔn)的會議、研討會中獲益;與專業(yè)觀眾和采購商建立合作和交流的機會;◆ 通過與主辦機構(gòu)及媒體的緊密配合,使您在展覽期間獲得更多關(guān)注;◆ 與來自中國及亞太地區(qū)的代理商、渠道商、系統(tǒng)集成及解決方案提供商尋求合作。
·參展范圍 CMEH 2012●醫(yī)療器械:各類新型醫(yī)療儀器和醫(yī)用配套儀器、心臟監(jiān)護、醫(yī)學(xué)影像、生化分析儀器、血壓計及溫度計等各類居家醫(yī)療器材;●診斷治療設(shè)備:X 線診斷檢查設(shè)備、超聲診斷、核醫(yī)學(xué)、內(nèi)窺鏡系統(tǒng)、五官科治儀器、動態(tài)分析儀器、低溫冷凍設(shè)備、透析治療設(shè)備、急救器材等;●病房護理設(shè)備及器具:各類病床、柜、手術(shù)椅、床等;●輔助設(shè)備:消毒滅菌系列產(chǎn)品、制氧供氧設(shè)備、血庫裝備、醫(yī)用數(shù)據(jù)及圖像處理設(shè)備、康復(fù)器械、殘疾人專用器材等;●口腔醫(yī)療器械設(shè)備:牙科診斷醫(yī)療設(shè)備、牙科手術(shù)器械、牙科技工設(shè)備;●醫(yī)院遠程醫(yī)療系統(tǒng)、醫(yī)院醫(yī)療信息系統(tǒng)、醫(yī)院辦公自動化系統(tǒng);●醫(yī)用敷料:醫(yī)繃帶、紗布、口罩、手術(shù)衣、醫(yī)用橡皮膏、創(chuàng)口貼、棉球、醫(yī)用手套、手術(shù)保護膜、醫(yī)用透氣膠帶、膠粘劑、敷貼、一次性注射器、輸液器;●眼科醫(yī)療設(shè)備、骨科醫(yī)療設(shè)備、臨床檢驗設(shè)備及診斷試劑;●手術(shù)室、急救室、診療室設(shè)備及器具;●醫(yī)療軟件及信息處理系統(tǒng)醫(yī)療媒介及相關(guān)服務(wù);·參展費用(注:雙面開口展位加收20%費用) 展 臺 類 型 國內(nèi)企業(yè) 合資企業(yè) 境外企業(yè) 標(biāo) 準(zhǔn) 展 臺 ¥12800元/9m2 ¥25800元/9m2 USD4800元/9m2 豪華標(biāo)準(zhǔn)展臺 ¥15800元/9m2 ¥28800元/9m2 USD5280元/9m2 室內(nèi)光地(36m2起租) ¥1300元/m2 ¥2600元/m2 USD480元/m2 標(biāo)準(zhǔn)展位配置:提供三面圍板、洽談桌一張、 椅子兩把、中英文楣板,二盞射燈、220V/5A電源插座一個、展位鋪滿地毯;)其他額外開支由展商承擔(dān)。空場地費用包括:展出場地、地毯、保安服務(wù)、展位清潔服務(wù)!緯捌渌鼜V告】 封 面:¥36000元 封 底:¥30000元 封 二:¥20000元 封 三:¥15000元 扉 頁:¥12000元 彩整版:¥8000元 黑整版:¥5000元 文字整版:¥3000元 拱 門:30000元/期 氣 球:¥20000元/期 條幅:¥20000元/期 門票:¥30000元/5萬張 鉆石贊助商:500000元 贊助商:400000元 銀牌贊助商:300000元 參展/參觀證:¥50000元 【研討會】國內(nèi)企業(yè)36000元/場 境外企業(yè)元USD6800/場展覽會期間主辦單位將組織多場研討會,以開展國際技術(shù)、經(jīng)貿(mào)交流,宣傳、介紹產(chǎn)品。各單位均可報名申請舉辦,請自定交流主題,并與參展報名表一并報于組織單位,以便及早安排交流場地和設(shè)施,并提供配備:會議室場地2小時、桌椅、1臺投影儀、2個麥克風(fēng)、1塊幕布。CMEH 網(wǎng)址:www.china-medicalfair.com
人可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)elisa試劑盒參數(shù):
編號 | 中文名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
F3263-A | 人可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)elisa試劑盒 | Human soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1,sPECAM-1 elisa Kit | 48T |
編號 | 中文名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
F3263-A | 人可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)elisa試劑盒 | Human soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1,sPECAM-1 elisa Kit | 48T |
人可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)elisa試劑盒廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中,我們來介紹一下更簡便的操作說明,編號:F3263-A,英文名稱Human soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1,sPECAM-1 elisa Kit
1、人可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)elisa試劑盒操作方法一用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:(1).包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。 (2).加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。 (3).加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。 (4).加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。 (5).終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。 (6).結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
2、人可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)elisa試劑盒操作方法二:用于檢測未知抗體的間接法: (1).用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。 (2).加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)(3).于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,最后一遍用DDW洗滌。 (4).于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘 (5).于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml (6).可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。 ELISA是一種敏感性高、特異性強、重復(fù)性好的實驗診斷方法,由于其試劑穩(wěn)定、易保存、操作簡便、結(jié)果判斷較客觀等因素,以及既適宜于大規(guī)模篩查試驗又可以用于少量標(biāo)本的檢測,既可以做定性試驗也可以做定量分析等優(yōu)點,已廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)、寄生蟲學(xué)、腫瘤學(xué)和細(xì)胞因子等領(lǐng)域。
3、臨床標(biāo)本的收集和保存 用于ELISA測定的臨床標(biāo)本最為常用的是血清(漿),有時因為特定的檢測目的,也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標(biāo)本。目前臨床上使用血清標(biāo)本測定的標(biāo)志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物、激素、特種蛋白、細(xì)胞因子和治療藥物等。對用于激素和治療藥物測定的血清標(biāo)本的收集,要注意收集時間甚或體位有可能會對測定結(jié)果產(chǎn)生影響。如可的松在早晨4~6點之間,會有一峰值出現(xiàn):生長激素、促黃體激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以陣發(fā)性方式釋放,因此,在測定此類激素時,有必要在密切相連的時間間隔內(nèi)采取數(shù)份血樣本,以其中間值為測定值。又如當(dāng)從臥位變?yōu)檎玖⑽粫r,血清中腎素活性將出現(xiàn)明顯增高。再如治療藥物的檢測,應(yīng)根據(jù)藥代動力學(xué)選擇服藥后的最適時間抽血檢測。用于傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物和特種蛋白等的檢測的血清標(biāo)本的收集則沒有時間和體位方面的影響,只是在處理和保存方面要考慮。
(1)要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。(2)樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。(3)血清標(biāo)本如是以無菌操作分離,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應(yīng)在-70℃以下。(4)冰凍保存的血清標(biāo)本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。標(biāo)本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用,從而引起假陰性結(jié)果。此外,凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)注意,不要進行劇烈振蕩,反復(fù)顛倒混勻即可。(5)標(biāo)本在保存中如出現(xiàn)細(xì)菌污染所致的混濁或絮狀物時,應(yīng)離心沉淀后取上清檢測。
4、試劑準(zhǔn)備 在臨床實驗室,對試劑準(zhǔn)備一般不太注意,通常的做法是,在實驗時將試劑從冰箱中拿出來即用,而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時間不夠的問題,其直接的后果是對一些弱陽性標(biāo)本的檢測出現(xiàn)假陰性。因此在ELISA測定中試劑的準(zhǔn)備最為關(guān)鍵的是,在實驗開始前,將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20分鐘以上后,再進行測定,以使試劑盒在使用前與室溫平衡。這樣做的目的,主要是為了在后面的溫育反應(yīng)步驟中,能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度能較快地達到所要求的高度,以滿足測定要求。其次,目前的商品ELISA試劑盒中的洗板液均需在實驗室使用時對所提供的濃縮液稀釋配制,因此稀釋時所用的蒸餾水或去離子水應(yīng)保證質(zhì)量。此外,當(dāng)試劑盒以O(shè)PD為底物時,則底物溶液應(yīng)在反應(yīng)顯色前臨時配制。
在現(xiàn)在的ELISA商品試劑盒中,血清樣本的加入幾乎是唯一的要使用微量加樣器加入樣本的步驟。使用微量加樣器加樣必須注意的關(guān)鍵點是:加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快,無法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會對鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。試劑的加入在國產(chǎn)試劑盒中基本上均是從滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出現(xiàn)重復(fù)滴加或加在兩孔之間的現(xiàn)象,這樣就會在孔內(nèi)的非包被區(qū)出現(xiàn)非特異吸附,從而引起非特異顯色。所以,有時候一份標(biāo)本用相同的試劑盒這次測定為陽性,下次測定為陰性,往往就是上述加樣及試劑的錯誤所致。
四、溫育溫育是ELISA測定中影響測定成敗最為關(guān)鍵的一個因素。ELISA作為一種固相免疫測定,抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相上進行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原完全結(jié)合,必須在一定的溫度條件下反應(yīng)一定的時間。溫育所需時間與溫度成反比,即溫度越高,則所需時間相對較短。最為常用的溫育溫度有37℃和室溫,其次是43℃和2~8℃。溫育這一步是臨床ELISA測定中最容易出現(xiàn)問題的步驟。通常目前國內(nèi)ELISA商品試劑盒的反應(yīng)溫育時間為37℃ 30分鐘~1小時,進口ELISA試劑盒則通常為37℃ 1~2小時才能有較完全的結(jié)合,低于1小時,可能會影響測定下限。因此,關(guān)于溫育,在實際測定操作中一定要注意以下幾點:要保證在設(shè)定的溫度下有足夠的反應(yīng)時間。一般來說,加完樣本和/或反應(yīng)試劑后,將微孔板從室溫拿至水浴箱或溫箱中時,孔內(nèi)溫度從室溫升至37℃,需要一定的時間,尤其是在室溫比較低以及非水浴的狀態(tài)下,這段升溫時間可能還比較長,而在臨床實驗室中,很少有人注意這個問題,通常是將微孔板一放入溫箱即開始計時,這樣就很容易造成實際測定中溫育時間不夠,弱陽性樣本測不出來的問題。曾有一地處南方的血站同行提出了一個問題,就是在每一年的冬季總有那么一個多月的時間,在做HBsAg測定的室內(nèi)質(zhì)控中,測定由衛(wèi)生部臨床檢驗中心供應(yīng)的1 ng/ml弱陽性樣本時,總是測不出來,不知原因為何?這可能就與南方冬天室內(nèi)溫度較低有關(guān),此時微孔板轉(zhuǎn)入溫箱后37℃溫育時間不夠,以致弱陽性樣本測定為陰性。因此,為保證37℃下足夠的溫育時間,臨床實驗室可自行確定本實驗室不同季節(jié)(不同室溫下)微孔板從室溫拿至溫箱后需要多長時間孔內(nèi)溫度才能達到37℃,從而適當(dāng)延長板條在溫箱中的放置時間。具體的做法是,用一小溫度計放置板孔反應(yīng)溶液中測量觀察即可。