荷蘭ceditest 瑞士Prionics 華南總代理 廣州市瑞品生物技術(shù)有限公司
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瑞士Prionics牛布病布氏桿菌毒病抗體檢測(cè)試劑盒
簡(jiǎn)介一些年來,荷蘭動(dòng)物科學(xué)與健康研究所已經(jīng)建立了控制和消除動(dòng)物疾病的專門技術(shù)和知識(shí)體系。依靠對(duì)病因病理的基礎(chǔ)性研究,該組織為全球?qū)iT的實(shí)驗(yàn)室和獸醫(yī)服務(wù)機(jī)構(gòu)提供了病毒學(xué)、細(xì)菌學(xué)、寄生蟲學(xué)和免疫學(xué)科研工具。布氏菌病在世界各地均有發(fā)生,是一種人畜共患病,病原為布氏桿菌(革蘭氏陰性菌),這類細(xì)菌包含6種:牛B流產(chǎn)型,羊B.melitensis (3 biovars), 豬B. suis (5 biovars), B. ovis, 狗B. canis, B. neotomae and B. maris. 牛是B流產(chǎn)型主要的宿主,,綿羊和山羊是B. melitensis的主要宿主。原則上講,布氏桿菌不同亞型感染動(dòng)物,臨場(chǎng)癥狀有可比性,且都是繁殖障礙。例如,母畜的流產(chǎn)和不孕公畜的睪丸炎和附睪炎。人類感染布氏桿菌的癥狀是波浪熱,這對(duì)農(nóng)民、實(shí)驗(yàn)室工作人員和屠宰工作人員來說是相當(dāng)危險(xiǎn)的。特別是B. melitensis對(duì)人類有高度的致病性,是世界上人畜共患病最嚴(yán)重的病原之一。被污染的山羊奶酪已經(jīng)被頻繁的報(bào)道說是感染原,F(xiàn)在已經(jīng)發(fā)展了一些檢測(cè)布氏桿菌的血清學(xué)方法,膠合測(cè)試,補(bǔ)體反應(yīng)和ELISA’s是應(yīng)用比較廣泛的確認(rèn)方法。所有檢測(cè)抗體都是針對(duì)滑型LPS O鏈的。無論使用那種檢測(cè)方法,都應(yīng)該與注意革蘭氏陽性菌的交叉反應(yīng),如Francisella tularensis, Campylobacter, Salmonella,Pasteurella, Yersinia enterocolitica 0:9, Escherichia coli O:117 and 0:156 。感染B流產(chǎn)型和B. melitensis后,會(huì)出現(xiàn)IgM抗體,緊跟著會(huì)出現(xiàn)IgG抗體(IgG1和IgG2)。本試劑盒就是檢測(cè)血清和牛奶中的IgG1抗體,且是一個(gè)經(jīng)過Bercovich etal(1990)修正的檢測(cè)試劑盒,也符合歐盟64/432的指示標(biāo)準(zhǔn)。試劑盒有所有檢測(cè)是需要的試劑,可以檢測(cè)440個(gè)樣品或者220個(gè)重復(fù)的血清樣品。
參考文獻(xiàn)(1) Bercovich, Z. and Taaijke, R. (1990) EnzymeImmunoassay using monoclonal antibodies for the detection of Brucella abortusantibodies in cow milk. J. Vet. Med. B 37, 735-759.(2) OIE Manual of standards for Diagnostics Test andVaccines, Fourth Edition, 2000.
應(yīng)用本試劑盒是檢測(cè)牛、山羊、綿羊血清和牛奶樣品中布氏桿菌的有效手段。是動(dòng)物健康免疫程序中檢測(cè)個(gè)體羊或牛布什桿菌抗體的決定性步驟。本試劑盒用來監(jiān)督、確認(rèn)整個(gè)群體是否有布什桿菌病的發(fā)生。
檢測(cè)原理本試劑盒是用間接ELISA檢測(cè)感染牛、綿羊、山羊的布氏桿菌抗體。用超聲波降解的非活性的布氏桿菌抗原包被酶標(biāo)板,加血清和牛奶樣品。測(cè)試樣品中存在流產(chǎn)型和melitensis抗體,孵化后就會(huì)和抗原反應(yīng)。加帶有HRP的抗Ig的單克隆抗體酶標(biāo)結(jié)合物,就會(huì)和抗原抗體結(jié)合物中的抗體反應(yīng)。之后,加底物,如果檢測(cè)樣品中有特異性抗體出現(xiàn),就會(huì)有顏色反應(yīng)。每板中應(yīng)使用3個(gè)對(duì)照血清樣品,分別為陽性、陰性、和一個(gè)弱陽性。這三個(gè)血清對(duì)照已經(jīng)根據(jù)OIE規(guī)定的ELISA國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)校對(duì)過了。樣品的OD值應(yīng)該減去空白的OD值,對(duì)比1是檢測(cè)中最大的OD值,對(duì)比2應(yīng)該是陰性的,pp<20%,對(duì)比3為弱陽性的,pp值應(yīng)該20-45%。
一般評(píng)述如果沒有前面的注意事項(xiàng),此說明書的一些內(nèi)容很容易變化。但是此試劑盒自從公布之日起一直都是完整而精確的,所以對(duì)使用以上操作方法產(chǎn)生的結(jié)果負(fù)責(zé)。
試劑盒成分1) 酶標(biāo)板5塊 5 testplates 2) 濃縮酶標(biāo)記物,1瓶 conjugate(concentrated) 3) 陽性對(duì)照血清,1瓶 1 vial reference serum1(positive) 4) 陰性對(duì)照血清,1瓶 1 vial reference serum2(negative) 5) 弱陽性對(duì)照血清,1瓶1 vial reference serum(weak positive) 6) 濃縮稀釋緩沖液,1瓶 1 vial dilution buffer(concentrated) 7) 底物液,1瓶(直接使用)1 vial chromogen /substrate (ready to use) 8) 濃縮洗液,1瓶 1 vial washing fluid (concentrated) 9) 終止液,1瓶(直接使用)1 vial stop solution(ready to use) 10) 10個(gè)封口膜10 platesealers
型號(hào) | 高分辨率機(jī)型 | 一般用途分辨率機(jī)型 | ||
DK805SAR | DK805SBR | DK805SAR5 | DK805SBR5 | |
DK805SALR | DK805SBLR | DK805SALR5 | DK805SBLR5 | |
DK805SAFR | DK805SBFR | DK805SAFR5 | DK805SBFR5 | |
DK805SAFLR | DK805SBFLR | DK805SAFLR5 | DK805SBFLR5 | |
輸出 | A/B參考點(diǎn)訊號(hào) 差動(dòng)線路驅(qū)動(dòng)器輸出(符合EIA-422) | |||
分辨率 | 0.1μm | 0.5μm | ||
測(cè)量范圍 | DK805S:5mm | |||
精度(20℃時(shí)) | 1μm p-p | 1.5μm p-p | ||
測(cè)量力 | DK805S 向下:0.45±0.25N 水平方向:0.40±0.25N 向上:0.35±0.25N | |||
參考點(diǎn) | 一處(在軸心運(yùn)動(dòng)的1mm位置) | |||
最大回應(yīng)速度 | 80m/min | 42m/min | 250m/min | 100m/min |
抗震(20至2000Hz) | 100 m/s2 | |||
抗撞擊(11ms) | 1000 m/s2 | |||
保護(hù)結(jié)構(gòu)*1 | SAR/SBR:IP66,SALR/SBLR:IP64(IP67*2) | |||
作業(yè)溫度 | 0攝氏度至50攝氏度 | |||
保存溫度 | -20攝氏度至60攝氏度 | |||
電源電壓 | DC+5V±5% | |||
耗電量 | 1W | |||
線纜長(zhǎng)度 | 2.5m | |||
主桿直徑 | Ø8 0-0.009mm | |||
重量*3 | 約30g | |||
探針 | 附有碳化物球形尖端(DZ-123)安裝螺絲M2.5 | 附有鋼珠尖端,安裝螺絲M2.5 | ||
配件 | 內(nèi)附扳手、使用說明書、補(bǔ)充說明、+P M4*5螺絲(2)、軟管彎頭(僅限于SAL與SBL型) | |||
輸出電纜長(zhǎng)度(可以連接到電子設(shè)備部分) | 最長(zhǎng)22m | |||
使用壽命*4 | 無撞擊情況下至少3000萬次 |
KBO-12C/M1/02M,KBO-12C/M1/02M,KBO-12C/M1/02M,KBO-12C/M1/02M
如有訂做或技術(shù)問題,安裝問題,請(qǐng)來電咨詢。 Q-KBO采用模塊化的單一產(chǎn)品結(jié)構(gòu)型式,集成了傳統(tǒng)的斷路器(熔斷器)、接觸器、過載(或過流、斷相)保護(hù)繼電器、起動(dòng)器.隔離器、電機(jī)綜合保護(hù)器等低壓電器產(chǎn)品的主要功能,具有遠(yuǎn)距離自動(dòng)控制和就地直接人力控制功能,具有面板指示及機(jī)電信號(hào)報(bào)警功能,具有過壓欠壓保護(hù)功能,具有斷相缺相保護(hù)功能,具有欠流欠功率功能,-電流保護(hù)特性(具有過載反時(shí)限、定時(shí)限、短路瞬時(shí)、特大短路瞬時(shí)四段保護(hù)特性)。根據(jù)需要選配功能模塊或附件,即可實(shí)現(xiàn)對(duì)各類電動(dòng)機(jī)負(fù)載、配電負(fù)載的控制與保護(hù)。
Q-KBO主要用于交流50Hz(60Hz)、額定電壓至690V、主體額定電流自6.3A至125A、智能控制器可調(diào)工作電流自0.16A至125A、控制電機(jī)功率自0.05KW至55KW的電力系統(tǒng)中接通、承載和分?jǐn)嗾l件(包括規(guī)定的過載條件)下的電流,且能夠接通、承載并分?jǐn)嘁?guī)定的非正常條件(如短路)下的電流。
參數(shù)說明●兩個(gè)外形安裝尺寸:125型(D框架)和45型(C框架)。 ●主電路極數(shù)分為:三極、四極。 ●控制與保護(hù)開關(guān)電器的基本配置:主體+智能控制器+輔助觸頭組。 ●主體由主電路基本模塊即:觸頭系統(tǒng)模塊、短路脫扣器、電磁系統(tǒng)以及操作機(jī)構(gòu)系統(tǒng)模塊構(gòu)成。 ●短路分?jǐn)嗄芰Φ燃?jí):經(jīng)濟(jì)型(c)為35KA,標(biāo)準(zhǔn)型(Y)50KA,高分?jǐn)嘈停℉)80KA。 ●預(yù)期短路電流下的分?jǐn)鄷r(shí)間為2-3ms,限流系數(shù)0.2以下。 ●輔助觸頭組由短路報(bào)警觸頭、過載報(bào)警觸頭以及一組2常開1常閉輔助觸頭構(gòu)成,02為2常開 閉+1短路1過載、06為3常開2常閉+也可根據(jù)用戶要求組合,但最多不能超過11對(duì)觸頭數(shù)。 ●智能控制器額定電流Ie: 0.4/1/2.5/4/6.3/12/16/18/25/32/40/45/50/63/80/100/125A。 ●主體額定電流In: 12/16/18/32/45/63/100/125A。 ●極數(shù):用二位數(shù)字表示(前一位數(shù)字表示產(chǎn)品極數(shù)、后一位數(shù)字表示保護(hù)極數(shù)),如33表示3極帶3極保護(hù)、30表示3極不帶保護(hù)。 ●控制電源電壓:M:AC220V、Q:AC380V。
KBO-12C/M1/02M【專業(yè)生產(chǎn)廠家】
豬胱抑素C(CST3/Cys-C)(ELisa)酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟:
1、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50µl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40µl,然后再加待測(cè)樣品10µl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
2、溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。
3、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
4、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此
重復(fù)5次,拍干。
5、加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50µl,空白孔除外。
6、顯色:每孔先加入顯色劑A50µl,再加入顯色劑B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
10 分鐘.
7、終止:每孔加終止液50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
8、測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
公司常年代理德國(guó)TSZ品牌、Mercodia品牌、Panbio品牌、Alpco品牌、CST品牌、IBL-America品牌、AbFrontier品牌、Calbiotech品牌、Anogen品牌、Ani Biotech品牌、AAT Bioquest品牌、Jaica品牌等ELISA試劑盒。
ELISA Kit for Angiotensin II (AngII)血管緊張素Ⅱ(ANGⅡ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)規(guī)格:48T/96T
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ELISA Kit for Angiotensin II (AngII)血管緊張素Ⅱ(ANGⅡ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)規(guī)格:48T/96T
ELISA Kit for Amphiregulin (AREG)雙調(diào)蛋白(AREG)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)規(guī)格:48T/96T
ELISA Kit for Amphiregulin (AREG)雙調(diào)蛋白(AREG)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)規(guī)格:48T/96T
ELISA Kit for Angiogenin (ANG)血管生長(zhǎng)素(ANG)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)規(guī)格:48T/96T
ELISA Kit for Angiopoietin 1 (ANGPT1)血管生成素1(ANGPT1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)規(guī)格:48T/96T
ELISA Kit for Angiopoietin 2 (ANGPT2)血管生成素2(ANGPT2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)規(guī)格:48T/96T
ELISA Kit for Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF)腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)規(guī)格:48T/96T
ELISA Kit for Activin A (ACVA)激活素A(ACVA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)規(guī)格:48T/96T
ELISA Kit for Activin A (ACVA)激活素A(ACVA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)規(guī)格:48T/96T
ELISA Kit for Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF)腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)規(guī)格:48T/96T
ELISA Kit for Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF)腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)規(guī)格:48T/96T
ELISA Kit for Betacellulin (bTC)β細(xì)胞素(βTC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)規(guī)格:48T/96T
ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2)骨成型蛋白2(BMP2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)規(guī)格:48T/96T
ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2)骨成型蛋白2(BMP2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)規(guī)格:48T/96T
ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2)骨成型蛋白2(BMP2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)規(guī)格:48T/96T
ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4)骨成型蛋白4(BMP4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)規(guī)格:48T/96T
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ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein Receptor 1A (BMPR1A)骨成型蛋白受體1A(BMPR1A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)規(guī)格:48T/96T
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JCZ7-630/12交流真空接觸器適用與交流50HZ,額定電壓12KV,額定電流630的饋電網(wǎng)絡(luò),供遠(yuǎn)距離接通和分?jǐn)嚯娐罚约邦l繁啟動(dòng)和停止交流電動(dòng)機(jī)之用,并適用于各種保護(hù)裝置配合,組裝成隔爆型電子啟動(dòng)器。
規(guī)格;JCZ7-160A 400A 250A 630A/12KV-7.2KV
中文名稱:人C4結(jié)合蛋白(C4BP)ELISA檢測(cè)試劑盒英文名稱: Human C4 binding protein,C4BP elisa試劑盒
標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
運(yùn)輸方面:現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。
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人網(wǎng)膜素(omentin)ELISA檢測(cè)試劑盒
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主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
ELISA試劑盒種屬齊全:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
產(chǎn)品運(yùn)輸方面:部分現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨
2、檢測(cè)原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
3、服務(wù)承諾:工作時(shí)間內(nèi)免費(fèi)技術(shù)咨詢和指導(dǎo),提供來樣檢測(cè)及免費(fèi)代測(cè)服務(wù),保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性。
4、研究領(lǐng)域:炎癥研究、神經(jīng)生物學(xué)、腫瘤研究、新陳代謝、信號(hào)通路、免疫學(xué)、傳染病、其他研究。
如果人E鈣粘附分子(E-Cadherin)ELISA試劑盒所檢測(cè)的樣本不是連續(xù)的,所以實(shí)驗(yàn)中不用的板條立即放回包裝中,密閉封口,4℃可保存1個(gè) 月。其余不用試劑應(yīng)包裝好或蓋好。在做樣本檢測(cè)前要有一個(gè)完整的計(jì)劃,如標(biāo)本編號(hào)、所測(cè)項(xiàng)目、目的等。操作時(shí)盡量使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
主要分為以下系列:
1、細(xì)胞因子檢測(cè)試劑盒
2、內(nèi)分泌檢測(cè)試劑盒
3、肝纖維化檢測(cè)試劑盒
4、心肌梗塞檢測(cè)試劑盒
5、腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)試劑盒
6、自身免疫檢測(cè)試劑盒
7、優(yōu)生優(yōu)育檢測(cè)試劑盒
8、傳染病檢測(cè)試劑盒等等。
人E鈣粘附分子(E-Cadherin)ELISA試劑盒操作步驟
方法一 用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)O·D值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O·D值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。
方法二 用于檢測(cè)未知抗體的間接法:
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,最后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
人E鈣粘附分子(E-Cadherin)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
1. 正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在人E鈣粘附分子(E-Cadherin)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,選擇好各項(xiàng)ELISA實(shí)驗(yàn)條件是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的最適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值最大而蛋白量最少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
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