試劑盒采用雙抗體夾心法,使用了兩種高特異性的抗體測(cè)定靶蛋白,以TMB作為顯色劑,顯色的強(qiáng)度與樣本中靶蛋白的量成正比。
二、試劑盒組成
1. 微孔板 (固相抗體) 96 well
2. 標(biāo)記抗體 (30倍濃縮,HRP標(biāo)記抗體) 0.4 ml
3. 標(biāo)準(zhǔn)品 0.5 ml × 2
4. EIA緩沖液 (1% BSA, 0.05% Tween-20 含有PBS) 30 ml
5. 標(biāo)記抗體稀釋液 (1% BSA, 0.05% Tween-20 含有PBS) 12 ml
6. 顯色液 (TMB底物液) 15 ml
7. 終止液 (1N硫酸) 12 ml
8. 洗滌緩沖濃縮液 (40倍濃縮,0.05% Tween-20的磷酸緩沖液) 50 ml
三高靈敏豬皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒廠商檢測(cè)程序
1.建立標(biāo)準(zhǔn)曲線:設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔8孔,每孔中各加入樣品稀釋液100ul,第一孔加標(biāo)準(zhǔn)品100ul,混勻后用加樣器吸出100ul,移至第二孔。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋至第六孔,最后,從第六孔中吸出100ul棄去。第七孔為空白對(duì)照,第八孔為零孔。2.加樣:待測(cè)品孔每孔各加入待測(cè)樣品100ul混勻。3. 將反應(yīng)板充分混勻后粘上封板紙置37 oC 120分鐘。4. 洗板:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。5. 每孔(除零孔)加第一抗體工作液50ul,置37℃ 60分鐘。6. 洗板:操作同4。7. 每孔(除零孔)加酶標(biāo)抗體工作液100ul(兩滴),將反應(yīng)板置37 oC 60分鐘。8. 洗板:同前。9.每孔加入底物液A、B各一滴,置37 oC避光反應(yīng)15分鐘。10. 終止:每孔加入1滴終止液混勻。11. 測(cè)定:在450nm處測(cè)吸光值。
四高靈敏豬皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒廠商的應(yīng)用
1.免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成分的定位。
2.研究抗酶抗體的合成。
3.顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。
4.定量檢測(cè)體液中抗原或抗體成分。
五技術(shù)原理試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。人肝素結(jié)合性表皮生長(zhǎng)因子HB-EGF由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。測(cè)定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復(fù)性好。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)
六高靈敏豬皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒廠商樣本處理
在收集標(biāo)本前需有一個(gè)完整的計(jì)劃,需要清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。ELISA檢測(cè)提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測(cè),對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆,如有特殊原因需要周期收集?biāo)本,請(qǐng)取材后,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差,蛋白極易降解,直接影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量,所以避免反復(fù)凍融。
七計(jì)算 以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
八高靈敏豬皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒廠商常見(jiàn)問(wèn)題
Q正確的收集或保存是什么
A確保正確的底物體積并混合。如果底物是凍干粉,用相應(yīng)緩沖液重懸完全,充分混合并在一定的期限內(nèi)使用。
Q如何正確的樣本制備
A說(shuō)明書(shū)中樣本制備方法已經(jīng)過(guò)性能測(cè)試驗(yàn)證,嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)推薦進(jìn)行樣本制備。確保使用正確的校正稀釋液。
Q工作臺(tái)溫度不均衡怎么辦
A避免在環(huán)境條件變化的位置孵育 96 孔板(如放置在通風(fēng)處或窗臺(tái)邊)。
Q如何防止體系液體蒸發(fā)
A保證移液器正常工作,必要時(shí)進(jìn)行重新校正。保證移液器吸頭連接緊密。使用同一種移液器吸取方式。Q 酶標(biāo)板分次使用 剩下的建議怎么保持 ?A要是真的用不完或標(biāo)本不多的情況下。做點(diǎn)處理后:板條和板架都是可拆卸的,可以再用之,前拆下4條放置錫箔袋或其他無(wú)污染的袋子,放到冰箱 2-8度保存。 九關(guān)于我們我司擁有完善的會(huì)員積分制,給新老會(huì)員提供最大的優(yōu)惠我司擁有專(zhuān)業(yè)的客服團(tuán)隊(duì)以客戶為中心為您提供貼心的售前售后服務(wù)
我司與南京各大高校均有合作,擁有獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)室可以提供專(zhuān)業(yè)免費(fèi)的高靈敏豬皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒廠商代測(cè)服務(wù)。
公司名稱(chēng): 青島藍(lán)天科技環(huán)保設(shè)備有限公司
聯(lián) 系 人 : 李恒(商務(wù)經(jīng)理)
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郵 編: 266100
認(rèn)證:
CSA認(rèn)證
PTB/ATEX認(rèn)證
JML認(rèn)證
CE認(rèn)證
特點(diǎn):
聲/光/振動(dòng)報(bào)警,低電壓報(bào)警
使用堿性電池可以持續(xù)檢測(cè)3000小時(shí)
帶背景燈的LCD顯示屏
規(guī)格
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青島藍(lán)天科技為您提供的技術(shù)支持和完善的售后服務(wù)!詳情咨詢(xún):0532-888 68758!
無(wú)錫埃費(fèi)爾流體智控儀器有限公司(aphe)自主生產(chǎn)電磁換向閥4V310-08B,ALV610F3C4-24V等:普通款,不銹鋼閥體,Exd II CT4-6防爆電磁閥,本安電磁閥。也選用AMSCO防爆線圈,NASS線圈。電磁閥可選二位五通,二位三通,貼板式(NAMUR型)或管接式。
食品工業(yè)是需要處處注意設(shè)備部件的領(lǐng)域。 所有部件都能夠承受被噴灑消毒劑和清洗。 此外,都必須符合嚴(yán)格的法律法規(guī)。 賽多利斯的發(fā)明表明電子技術(shù)的創(chuàng)新不一定是和工業(yè)的堅(jiān)固是對(duì)立的。 賽多利斯Combics食品工業(yè)秤是按照歐洲衛(wèi)生設(shè)備設(shè)計(jì)組織 ehedg 規(guī)則制造的 ,確認(rèn)符合整個(gè)產(chǎn)業(yè)所有的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn),并且特便于清洗和消毒。 Combics食品工業(yè)秤所有型號(hào)系列全是由高合金304型不銹鋼型號(hào) 1.4301 制造 -地應(yīng)用于食品工業(yè)。 平臺(tái)是可選電解AISI型號(hào)316 Ti不銹鋼 1.4571 。表面接觸食物的所有部件粗糙度低于0.8μm。
Combics食品工業(yè)秤特別設(shè)計(jì)適合于要公開(kāi)展示和食品接觸一整天的應(yīng)用,符合達(dá)到無(wú)菌的最嚴(yán)格要求并且能夠承受大量水高密度沖洗。這就決定了不僅使用在食品工業(yè)特別是魚(yú)肉類(lèi)加工 ,也適合化工業(yè)和制藥業(yè)等。
足夠堅(jiān)固適合所有使用
許多工程細(xì)節(jié)實(shí)施以方便操作者清潔和消毒秤。密封的稱(chēng)重傳感器位于兩部件之間 ,符合IP69K保護(hù)標(biāo)準(zhǔn),耐高溫耐清洗, 還符合IP68保護(hù)標(biāo)準(zhǔn),防塵設(shè)計(jì),可連續(xù)浸泡在水中使用.開(kāi)放式設(shè)計(jì),有利于防止污染,即使是最小的微粒污垢行業(yè)堆積物都無(wú)法隱藏。 電纜密封管提供的密性和易清潔性。 水準(zhǔn)測(cè)量原理優(yōu)化稱(chēng)量結(jié)果,也容易保持清潔.堅(jiān)固的機(jī)械過(guò)載保護(hù)稱(chēng)重系統(tǒng)在受到水平和垂直方向壓力時(shí)的安全。 賽多利斯結(jié)合了這些特點(diǎn)的性和性是眾所周知的。 賽多利斯Combics食品工業(yè)秤量程從6公斤到150公斤。 分辨率達(dá)到3000e和2 * 3000e2種范圍 ,透過(guò)精度class III和15,000d和30,000 D的標(biāo)準(zhǔn)認(rèn)證,非法定貿(mào)易標(biāo)準(zhǔn)。
每一步都
操作帶來(lái)自信的處理。 20毫米,高亮度黃色背光顯示屏,提供了一個(gè)的可讀性標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量。受益于創(chuàng)新設(shè)計(jì)的顯示屏和控制單元, 可以從幾乎任何角度來(lái)觀看。關(guān)鍵部位也很大,自信地操作只用輕輕敲擊。 一個(gè)鍵集成了三項(xiàng)重要的職能:毛重/凈重切換, 10倍分辨率轉(zhuǎn)換,單位轉(zhuǎn)換。 操作直觀,容易使用內(nèi)置的應(yīng)用程序,如控制預(yù)包裝平均重量 ,計(jì)數(shù), 重量百分比或動(dòng)物稱(chēng)重等等。即使是新的操作人員也有信心,秤體還有易于清洗的特別設(shè)計(jì)。這大大簡(jiǎn)化了分析和控制潛在危害,并有利于防止污染, 一切嚴(yán)格按照HACCP 危險(xiǎn)領(lǐng)域和關(guān)鍵控制點(diǎn)的規(guī)定。賽多利斯Combics食品工業(yè)秤符合所有國(guó)家-國(guó)際食品生產(chǎn)設(shè)備的要求,是潛在的大市場(chǎng)。
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
檢測(cè)方法: ELISA酶聯(lián)免疫法
說(shuō) 明 書(shū):隨貨發(fā)送,也可直接聯(lián)系在線銷(xiāo)售索取
測(cè)試種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、牛、羊、豬、雞、鴨elisa試劑盒等種屬
檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
試劑盒保存及有效期:2-8℃,避光保存:6個(gè)月。
產(chǎn)品產(chǎn)地:進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
產(chǎn)品庫(kù)存:
品牌:自主研發(fā)/進(jìn)口原裝
產(chǎn)品價(jià)格:價(jià)格優(yōu)惠,歡迎來(lái)電洽談!
試劑盒使用范圍:僅供科研檢測(cè),不得用于臨床.
產(chǎn)品價(jià)格:價(jià)格優(yōu)惠,歡迎來(lái)電洽談!
ELISA試劑盒定性定量檢測(cè)一步到位,可同時(shí)大批量完成多種屬的檢測(cè)工作,而且一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,正規(guī)專(zhuān)業(yè)的我們,一定能幫您,將實(shí)驗(yàn)做得更好,更精確。試驗(yàn)過(guò)程中,如有任何疑問(wèn)都可和我們聯(lián)系,無(wú)論是售前、售中、售后我們都將始終如一,將優(yōu)質(zhì)服務(wù)進(jìn)行到底。
供應(yīng)商:上海繁旌生物科技有限公司
上海繁旌生物ELISA試劑盒獨(dú)特優(yōu)勢(shì):
1、采用全進(jìn)口原料和抗體:高效、靈敏、特異,嚴(yán)格引進(jìn)國(guó)際技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行批量生產(chǎn)。
2、先進(jìn)的優(yōu)化方案:重復(fù)性高,可靠性。
3、技術(shù)服務(wù):專(zhuān)業(yè),及時(shí),耐心。
4、現(xiàn)貨供應(yīng):江浙滬隔天到貨,外地3-5天到貨。
ELISA試劑盒技術(shù)原理:
(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。
(2). 結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。
(3). 酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。
(4). 受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。
(5). 此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。測(cè)定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復(fù)性好。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。
ELISA試劑盒操作步驟:
1、包被過(guò)程(注意設(shè)置空白對(duì)照,陰性對(duì)照):
將所用抗原用包被稀釋液稀釋到適當(dāng)濃度(一般所需抗原包被量為每孔20-200μg),每孔抗原加入100μl,置37℃,4h,或4℃,24h;棄去孔中液體.(為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋或?qū)迤椒旁诘撞坑袧窦啿嫉慕饘贊窈兄?/span>)
2、封閉酶標(biāo)反應(yīng)孔:
5%小牛血清置37℃封閉40min.封閉時(shí)將封閉液加滿各反應(yīng)孔,并去除各孔中的氣泡,封閉結(jié)束后用洗滌液滿孔洗滌3遍,每遍3min.
洗滌方法:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,將洗滌液注滿板孔,放置2min略作搖動(dòng),吸干孔內(nèi)液,傾去液體后在吸水紙上拍干
洗滌次數(shù)3次
3、加入待檢測(cè)樣品(建立合適的濃度梯度):
檢測(cè)時(shí)一般采用1:50-1:400的稀釋度,應(yīng)采用較大稀釋體積進(jìn)行,一般保證樣品吸取量>20μl.
將稀釋好的樣品加入酶標(biāo)反應(yīng)孔中,每樣品至少加雙孔,每孔100μl,置于37℃,40-60min.用洗滌液滿孔洗滌3遍,每遍3min.
4、加入酶標(biāo)抗體:
酶標(biāo)抗體:根據(jù)酶結(jié)合物提供商提供的參考工作稀釋度進(jìn)行.37℃,30-60min之間.短于30min往往結(jié)果不穩(wěn)定.每孔加100μl.洗滌同前.
5、加入底物液(現(xiàn)用現(xiàn)配):
首選TMB-過(guò)氧化氫尿素溶液,OPD-過(guò)氧化氫底物液系統(tǒng)次之.
底物加入量:每孔100μl,置37℃避光放置3-5分鐘,加入終止液顯色.
6、終止反應(yīng):
每孔加入終止液50μl終止反應(yīng),于20min內(nèi)測(cè)定實(shí)驗(yàn)結(jié)果.
7、結(jié)果判斷:
OPD顯色后采用492nm波長(zhǎng),TMB反應(yīng)產(chǎn)物檢測(cè)需要450nm波長(zhǎng).檢測(cè)時(shí)一定要首先進(jìn)行空白孔系統(tǒng)調(diào)零.用測(cè)定標(biāo)本孔的吸收值與一組陰性標(biāo)本測(cè)定孔平均值的比值(P/N)表示,當(dāng)P/N大于2時(shí)作為抗體的效價(jià).(數(shù)值的大小依具體檢測(cè)要求而定.)
人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒經(jīng)過(guò)嚴(yán)格交叉反應(yīng)和干擾測(cè)試及穩(wěn)定性試驗(yàn);明確的敏感度;針對(duì)所有樣品類(lèi)型達(dá)到的性能;廣泛的檢測(cè)范圍可以滿足大多數(shù)檢測(cè)要求;完善的售后服務(wù)和免費(fèi)的技術(shù)支持免去您的后顧之憂,凡購(gòu)買(mǎi)試劑盒者都可享受我公司相應(yīng)折扣優(yōu)惠,如有需要,可來(lái)電咨詢(xún)購(gòu)買(mǎi)!
關(guān)于ELISA試劑盒
ELISA試劑盒在國(guó)內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見(jiàn)的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等。
ELISA試劑盒自從60-70年代問(wèn)世以來(lái),得到全世界科研工作者的認(rèn)可及推崇,在歐美及中國(guó)獲得很大的推廣,尤其是國(guó)內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展。
Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測(cè)試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類(lèi)戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測(cè)。
免疫測(cè)定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),所以任何優(yōu)質(zhì)的診斷試劑離不開(kāi)優(yōu)質(zhì)的原料,如抗原抗體,酶等。以前用于免疫測(cè)定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動(dòng)物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過(guò)各種化學(xué)合成方法制備。近年來(lái),隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測(cè)定試劑幾成為現(xiàn)實(shí)的新一代試劑,各種新型使用的測(cè)定方法也不斷出現(xiàn)。
HBsAg試劑特點(diǎn)(檢測(cè)模式:臨床抗體夾心法):包被抗體為山羊多抗。多抗具有高親和性和對(duì)抗原各種表位的反應(yīng)性。酶表抗體為與HBsAg有不同結(jié)合位點(diǎn)的鼠復(fù)合單位,可測(cè)得HBsAg變異樣品,提高檢測(cè)的特異性(99.98%)提高檢測(cè)的靈敏度,應(yīng)用Parl Ehrich 學(xué)說(shuō)(PEI)HBsAg標(biāo)準(zhǔn)品,對(duì)ad標(biāo)準(zhǔn)品的靈敏度為0.05ng/ml對(duì)ay標(biāo)準(zhǔn)品靈敏度為0.025ng/ml
ELISA檢測(cè)試劑盒應(yīng)用定性?shī)A心免疫檢測(cè)技術(shù),用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國(guó)型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段,分別來(lái)自于該毒株的開(kāi)放閱讀框2和開(kāi)放閱讀框3。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗體,這些抗體就會(huì)與HEV 的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過(guò)氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結(jié)合物就會(huì)與第一次孵育結(jié)合上的HEV IgM抗體相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時(shí)會(huì)發(fā)生酶-底物反應(yīng),只有那些含有HEV IgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會(huì)發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng),并在波長(zhǎng): 450nm處測(cè)量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測(cè)試標(biāo)準(zhǔn), O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽(yáng)性。
LISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。
然而,影響Elisa試驗(yàn)結(jié)果的因素很多,故加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。
特點(diǎn):一、高效、靈敏、特異的抗體; 二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性; 三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體; 四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類(lèi)型; 五、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
elisa試劑盒回收率是反應(yīng)待測(cè)物在樣品分析過(guò)程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標(biāo)液1PPM,就是1毫克/升,而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說(shuō)你的回收率是99%,這個(gè)與真實(shí)成分有密切的關(guān)系,說(shuō)明方法的準(zhǔn)確度。比如水中總無(wú)機(jī)氯含量測(cè)定,樣品水中含有無(wú)機(jī)氯20mg/L,取100mL被測(cè)水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無(wú)機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)樣品,測(cè)定時(shí)忽略體積變化,如果測(cè)定出樣品中無(wú)機(jī)氯為2.98mg/L,則認(rèn)為回收率為99%。
安全性
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
4. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
5. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
6. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
7. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
9. 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
10. 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
11. 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
12. 按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
elisa試劑盒測(cè)試要求
做好對(duì)照
正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說(shuō)明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
實(shí)驗(yàn)條件的選擇
在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的最適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值最大而蛋白量最少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見(jiàn)酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無(wú)色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
檢測(cè)范圍和靈敏度不同,用量少時(shí),可使用分裝,前期是它的長(zhǎng)久性不是很好。
試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線最高點(diǎn)OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。
試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)R≥0.98。
試劑盒重復(fù)性好,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<9 %。
試劑的組份都多給20%的富余量,確保完成48/96孔的檢測(cè),避免分次檢測(cè)可能造成試劑量不足的情況。
檢測(cè)抗體及酶結(jié)合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗(yàn)操作者準(zhǔn)確地做稀釋工作,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性
ELISA法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲(chóng)病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來(lái)測(cè)定抗體,而且也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大
COD型多聯(lián)環(huán)保電熱套
COD系列電熱套,采用耐用高溫?zé)o堿玻璃纖維做絕緣材料,電熱元件為封閉型,均包囊于絕緣層內(nèi),電熱套內(nèi)裝有保溫隔熱材料,熱的利用率高、通?梢怨(jié)電35%以上。因此具有省電,輕便,安全,加熱均勻,效率高,無(wú)明火,不易碰壞玻璃儀器等優(yōu)點(diǎn)。它可配用各種燒瓶,燒杯,錐形瓶,適用于科研、化工、油田、醫(yī)藥、大專(zhuān)院校和工礦等單位的化驗(yàn)室、分析室和實(shí)驗(yàn)室里的各種液體的加溫、保溫、蒸餾等,它是理想的實(shí)用加熱設(shè)備。
1. DM型內(nèi)熱式玻璃纖維電熱套(直熱式)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、使用方便,插上電源即可工作。
2. KDM型連續(xù)可調(diào)控溫電熱套(調(diào)壓式)在DM型的基礎(chǔ)上,增加了調(diào)壓電路,通過(guò)電壓改變起到了調(diào)溫的目的,增強(qiáng)了使用性。
3. ZHT型自動(dòng)恒溫電熱套(調(diào)壓恒溫式)本型號(hào)KDH型的基礎(chǔ)上,增加了恒溫電熱和電接點(diǎn)式水銀溫度計(jì)配合就可達(dá)到恒溫的目的。它的優(yōu)點(diǎn)是接上電接點(diǎn)溫度計(jì)(自配)就能恒溫,取下就變成連續(xù)可調(diào)電壓式恒溫,用途更加廣泛。
使用方法:
不調(diào)溫時(shí)、可調(diào)——固定開(kāi)關(guān)在固定位置相當(dāng)于直熱式、可延長(zhǎng)其壽命。
另:各種特殊型號(hào)的電熱套可來(lái)函、來(lái)樣定做。
魚(yú)類(lèi)皮質(zhì)醇(Cortisol)試劑盒,規(guī)格:96T/48T保存:2-8℃用途:科研實(shí)驗(yàn)檢測(cè)檢測(cè)標(biāo)本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)。魚(yú)類(lèi)皮質(zhì)醇(Cortisol)試劑盒,以其高品質(zhì)的質(zhì)量,良好的服務(wù)及實(shí)惠的價(jià)格贏得了客戶和科研機(jī)構(gòu)的青睞,我們竭誠(chéng)期待新老客戶的來(lái)電!公司提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),一周內(nèi)出結(jié)果,質(zhì)量,歡迎來(lái)電咨詢(xún)或索取說(shuō)明書(shū)。
樣器加入樣本的步驟。使用微量加樣器加樣必須注意的關(guān)鍵點(diǎn)是:加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快,無(wú)法微量加樣的性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會(huì)對(duì)鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。試劑的加入在國(guó)產(chǎn)試劑盒中基本上均是從滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出現(xiàn)重復(fù)滴加或加在兩孔之間的現(xiàn)象,這樣就會(huì)在孔內(nèi)的非包被區(qū)出現(xiàn)非特異吸附,從而引起非特異顯色。所以,有時(shí)候一份標(biāo)本用相同的elisa試劑盒這次測(cè)定為陽(yáng)性,下次測(cè)定為陰性,往往就是上述加樣及試劑的錯(cuò)誤所致。我公司其他小部分試劑:橄欖油/洋橄欖油/Olive oil但馬膠/但馬樹(shù)脂/達(dá)麻脂/達(dá)瑪膠/達(dá)瑪樹(shù)膠/娑羅雙樹(shù)脂/達(dá)馬樹(shù)脂/Gum dammar乳香膠/乳香/瑪?shù)蹣?shù)膠/瑪?shù)壑?瑪?shù)蹣?shù)脂/瑪締脂/膠粘劑/乳香樹(shù)脂/瑪珶脂/粘膠乳香樹(shù)膠/膠粘水泥/Gum mastic山達(dá)膠/山達(dá)脂/非洲松香/檜膠/方苞非洲柏膠/Gum sandarac蟲(chóng)膠/紫膠/蟲(chóng)膠臘/紫蟲(chóng)膠/漂白紫膠/Shellac柯柏膠/硬樹(shù)脂/礦樹(shù)脂/柯伯膠/柯帕樹(shù)脂/Gum copal中性樹(shù)膠/Neutral balsam植物凝膠/冷結(jié)樹(shù)酯/結(jié)冷膠/吡喃葡萄糖醛酸與6-脫氧-L-吡喃甘露糖和D-吡喃葡萄糖乙酸酯的聚合物鈣鉀鈉鹽/Phytagel歡迎咨詢(xún):魚(yú)類(lèi)皮質(zhì)醇(Cortisol)試劑盒。 鴨白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒 Duck Interleukin-8,IL-8 試劑盒 鴨白介素4(IL-4)試劑盒 Duck Interleukin-4,IL-4 試劑盒 鴨白介素2(IL-2)試劑盒 Duck Interleukin 2,IL-2 試劑盒 鴨子碳酸酐酶(CA)試劑盒 Duck carbonic anhydrase,CA 試劑盒 鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)試劑盒 Duck anti-prothrombins antibodies,aPT1/aPT2 試劑盒 魚(yú)類(lèi)主要組織相容性復(fù)合體(MHC)試劑盒 Fish major histocompatibility complex,MHC 試劑盒 鮭魚(yú)補(bǔ)體蛋白3(C3)試劑盒 Salmon Complement 3,C3 試劑盒 鮭魚(yú)補(bǔ)體蛋白4(C4)試劑盒 Salmon Complement 4,C4 試劑盒 魚(yú)類(lèi)白介素1α(IL-1α)試劑盒 Fish Interleukin 1α ,IL-1α 試劑盒 魚(yú)類(lèi)白介素1β (IL-1β)試劑盒 Fish Interleukin 1β,IL-1β 試劑盒 鯉魚(yú)卵黃蛋白原(VTG)試劑盒 Carp Vitellogenin,VTG 試劑盒 魚(yú)類(lèi)促性腺激素釋放激素(GnRH)試劑盒 Fish gonadotropin-releasing hormone,GnRH 試劑盒 鮭魚(yú)降鈣素(SCT)試劑盒 Salmon calcitonin,SCT 試劑盒 魚(yú)類(lèi)甲狀腺素(T4)試劑盒 Fish Thyroxine,T4 試劑盒 魚(yú)類(lèi)三碘甲狀腺原氨酸(T3)試劑盒 Fish Tri-iodothyronine,T3 試劑盒 魚(yú)類(lèi)皮質(zhì)醇(Cortisol)試劑盒 Fish Cortisol 試劑盒 魚(yú)類(lèi)超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)試劑盒 Fish high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP 試劑盒 魚(yú)骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)試劑盒 Fish Oste ocalcin/Bone gla protein,OT/BGP 試劑盒 山羊主要組織相容性復(fù)合體(MHC/OLA)試劑盒 Goat major histocompatibility complex,MHC/OLA 試劑盒 山羊白介素2受體(IL-2R)試劑盒 Goat Interleukin-2 receptor,IL-2R 試劑盒