JB4000型智能化х、γ輻射儀
放射性監(jiān)測(cè)儀 便攜式(環(huán)境/防護(hù))巡測(cè)儀JB4000型智能化х、γ輻射儀簡(jiǎn)介JB4000(A)型智能化х、γ輻射儀是監(jiān)測(cè)各種放射性工作場(chǎng)所х、γ射線輻射劑量率的專(zhuān)用儀器。和國(guó)內(nèi)同類(lèi)儀器相比,該儀器具有更大的劑量率測(cè)量范圍和能量響應(yīng)特性。該儀器廣泛用于衛(wèi)生、環(huán)保、冶金、石油、化工、放射性試驗(yàn)室、商檢等需進(jìn)行輻射環(huán)境與輻射防護(hù)檢測(cè)的場(chǎng)合。JB4000型為環(huán)境水平巡測(cè)儀,測(cè)量范圍為0~200µSv/h;JB4000(A)型為防護(hù)水平巡測(cè)儀,測(cè)量范圍為0~1500µSv/h。測(cè)量范圍最大可擴(kuò)展至0~2500µSv/h。特點(diǎn)與功能:
儀器靈敏度高,測(cè)量范圍大;能量響應(yīng)特性好單片機(jī)控制,操作簡(jiǎn)便;LCD液晶顯示,背光功能內(nèi)置25組劑量率儲(chǔ)存數(shù)據(jù),可隨時(shí)查看劑量率,累計(jì)劑量均可測(cè)量具有劑量率閾值報(bào)警功能具有劑量率過(guò)載報(bào)警功能具有探測(cè)器故障報(bào)警功能具有電池欠壓報(bào)警功能全不銹鋼外殼,適合野外作業(yè)
主要技術(shù)指標(biāo):
探 測(cè) 器:φ30×25mm,NaI(TL)靈 敏 度:1µSv/h≥350CPS能 量 閾:35Kev測(cè)量范圍:JB4000 型 劑量率:0.01~200.00µSv/hJB4000A型 劑量率:0.01~1500.00µSv/h累積劑量:0.00µSv~9999.99µSv能量范圍:40Kev~3Mev能量響應(yīng):40Kev~3Mev≤±30%(相對(duì)于137Cs)相對(duì)基本誤差:≤±10%測(cè)量時(shí)間:1、5、10、20、30秒可調(diào)節(jié)報(bào) 警 閾:0.25、2.5、10、20、(µSv/h)讀數(shù)顯示:劑 量 率:µSv/h、µGy/h、µR/h可選擇累計(jì)劑量:µSv 計(jì)數(shù)率:CPS功 耗:整機(jī)耗電≤160mW(不含顯示器背光耗電)重量尺寸:1.60Kg(連電池); 42×23×15(cm)
供應(yīng)商:上海仁日輻射防護(hù)設(shè)備有限公司:、13818065015 來(lái) 源:碘125, http://i125.shrenri.com.cn
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大鼠γ氨基丁酸(GABA)ELISA檢測(cè)試劑盒 本試劑僅供研究使用,如需詳細(xì)資料請(qǐng)來(lái)電咨詢(xún)北京華耐特生物科技有限公司。
本試劑盒僅供研究使用 有效期:6 個(gè)月1. 試劑盒保存:-20℃(較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí));2-8℃(頻繁使用時(shí))。2. 濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。3. 中、英文說(shuō)明書(shū)可能會(huì)有不一致之處,請(qǐng)以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。4. 剛開(kāi)啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。5. 所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。
關(guān)鍵詞:大鼠γ氨基丁酸,大鼠GABA ELISA kit,北京試劑盒廠家
主要特點(diǎn)• 高度靈敏的碘化銫閃爍晶體• 一節(jié)7 號(hào)電池可連續(xù)工作700 個(gè)小時(shí)• 通過(guò)micro-USB 實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)通訊• 累計(jì)計(jì)量檢測(cè)范圍為0.01μSv 至10Sv• 記錄每天、每周、每月、每年的輻射劑量• 內(nèi)置數(shù)據(jù)存儲(chǔ)空間可記錄5 年數(shù)據(jù)應(yīng)用領(lǐng)域• 民用“涉源”企事業(yè)單位• 受輻射影響的公眾• 飛行員、空乘人員及長(zhǎng)期飛行的乘客• 金屬熔煉加工企業(yè)• 疾控、衛(wèi)生行業(yè)• 環(huán)境監(jiān)測(cè)、海關(guān)、商檢等部門(mén)
標(biāo)準(zhǔn)配置• miniDOSE 主機(jī)• CD 光盤(pán)(含miniREC 軟件)• 硅膠護(hù)套• micro-USB 連接線• 操作說(shuō)明書(shū)• 手鏈• 校準(zhǔn)證書(shū)本公司專(zhuān)業(yè)提供各式氣體檢測(cè)儀。更多詳情可關(guān)注:http://www.safedtech.com
儀器適用于:
-未知區(qū)域射線巡測(cè)-環(huán)境實(shí)驗(yàn)室、環(huán)境污染調(diào)查-核醫(yī)學(xué)科、分子生物學(xué)、放射化學(xué)-進(jìn)出口商檢-室內(nèi)環(huán)境及建材放性檢測(cè)-輻射加工、無(wú)損探傷場(chǎng)所-核安全應(yīng)急
功能特點(diǎn):
-的GM管探測(cè)器,可測(cè)χ、γ射線-聲響頻率指示放射性強(qiáng)度-可設(shè)置劑量率報(bào)警、累計(jì)劑量報(bào)警閾值-超低功能設(shè)計(jì)、靈敏度高、對(duì)環(huán)境本底亦可測(cè)量-中英日三種語(yǔ)言操作界面可選-單位顯示μSv/h、μR/h、CPS、CPM-超閾值報(bào)警-可儲(chǔ)存400組歷史數(shù)據(jù)
技術(shù)指標(biāo):
-測(cè)量范圍:計(jì)數(shù)率0-6000000 CPM,0-1500 CPS 劑量率0.10-10000μSv/h,0.10-10000mR/h-探測(cè)器:GM探測(cè)器-儀器本底:每分鐘計(jì)數(shù)≤120CPM-相對(duì)基本誤差:≤15%-靈敏度:≥3000CPM/mR/h-能量范圍:40KeV-3MeV-供電電源:3節(jié)普通5號(hào)電池或充電電池-功耗:整機(jī)電流≤20mA-溫度范圍:-15℃-50℃-濕度范圍:相對(duì)濕度≤90%(40℃)-尺寸重量:200*100*35(mm);0.5kg
產(chǎn)地:白俄羅斯 品牌:Polimaster
簡(jiǎn)介 ·PM1701是一個(gè)加長(zhǎng)型的便攜式探測(cè)器,它可以用來(lái)探測(cè)以及尋找放射源 ·適用于惡劣環(huán)境、嘈雜環(huán)境以及常規(guī)檢測(cè)不容易探測(cè)到的情況 ·PM1701的靈敏度很高,外接全長(zhǎng)1m的加長(zhǎng)桿 ·開(kāi)機(jī)以后,儀器自動(dòng)檢測(cè)和儲(chǔ)存本底,并且按照用戶(hù)預(yù)先設(shè)置好的參數(shù) ·計(jì)算出報(bào)警閾值,一旦超標(biāo),耳機(jī)將發(fā)出報(bào)警信號(hào) ·并且根據(jù)距離放射源的遠(yuǎn)近,發(fā)出不同頻率的聲音 ·因?yàn)閮x器可以很輕松地轉(zhuǎn)換為真實(shí)本底 ·所以很容易在本底降低或者本底環(huán)境比天然環(huán)境要高的情況下 ·探測(cè)并尋找到放射屏蔽的放射源 ·PM1701操作方便,不需要特殊的知識(shí) ·該儀器適用于卡車(chē)、領(lǐng)土、工廠、廢物以及廢鋼檢測(cè) 技術(shù)參數(shù)
靈敏度: | >100 cps/(μSv/h) 137Сs |
技術(shù)范圍: | 1 ~ 9999 cps |
能量響應(yīng): | 0.06 ~ 3.0 MeV |
技術(shù)時(shí)間: | 本底模式 36 s, 巡檢模式 2 s |
n系數(shù)的范圍和幅度(當(dāng)前本底平均平方偏差的數(shù)目): | 1 ~ 7 |
探測(cè)活度: | 55 kBq 133Ba,距離0.2m, 速度0.2 m/s |
誤報(bào)頻率: | (n=3)1 min-1 |
電源: | 4 AA 堿性電池 |
電池壽命: | 1000小時(shí)(0 ~ 50 °C, 關(guān)閉聲音) |
工作溫度: | -30 ~ +50 °C -15 ~ +50 °C(LCD ) |
濕度: | 95%(35 °C) |
抗摔: | 0.7m(水泥地) |
重量: | < 0.85 кг |
尺寸: | 54 x 202 x 646 mm |
X、γ輻射個(gè)人劑量報(bào)警儀以經(jīng)補(bǔ)償GM計(jì)數(shù)管為探測(cè)器的多功能個(gè)人劑量測(cè)量?jī)x。儀器采用低功耗單片機(jī),體積小,靈敏度高,穩(wěn)定性好,主要用來(lái)監(jiān)測(cè)各種放射性場(chǎng)所的X、γ及硬β射線,可隨身佩戴。近幾年在環(huán)保、衛(wèi)生、冶金、油田、鋼鐵、出入境檢驗(yàn)檢疫、探傷等行業(yè)運(yùn)用非常廣泛,是個(gè)人防護(hù)和測(cè)量累積劑量的儀器。儀器特點(diǎn)1、同時(shí)測(cè)量累積劑量和劑量率2、采用LCD液晶顯示屏,背光功能,顯示清晰3、具有時(shí)鐘功能,關(guān)機(jī)后時(shí)鐘正常運(yùn)行4、有聲音和振動(dòng)2種報(bào)警方式5、可設(shè)置劑量率報(bào)警閾值6、劑量率閾值報(bào)警功能7、電池欠壓報(bào)警功能8、故障報(bào)警功能9、切斷電源后能長(zhǎng)時(shí)間保存累積劑量10、小巧輕便,適合野外操作11、內(nèi)置電源,USB充電端口,連接電腦即可充電技術(shù)參數(shù)顯 示 :LCD 液晶顯示器外 殼 : 硬塑制探 測(cè) :器 GM計(jì)數(shù)管報(bào)警類(lèi)別 :閾值、過(guò)載、故障、電池欠壓報(bào)警報(bào)警方式 :聲音+光+振動(dòng)報(bào)警工作溫度 :-20℃~50℃相對(duì)濕度 :90%(40℃)供點(diǎn)電源 :內(nèi)置充電電池功 耗 :<5mW尺 寸 :92×58×25(mm)重 量 :120g(連電池)測(cè)量范圍 :劑量率:0~30mSv/h累積劑量 :0~9999.99mSv相對(duì)誤差 :≤±30%(10uSv/h~30mSv/h≤±10%)重復(fù)性 :≤10%能量范圍 :40Kev~1.5Mev(137Cs歸一≤20%,經(jīng)補(bǔ)償≤30%)防護(hù)報(bào)警響應(yīng)時(shí)間: ≤1秒(在劑量率≥15 uSv/h)
精品系列: 安規(guī)檢測(cè)儀器儀表 水質(zhì)分析儀 氣體分析儀 溫濕度儀表 環(huán)境檢測(cè)儀 電工測(cè)試儀器 壓力儀表 無(wú)損檢測(cè)儀表 光學(xué)儀器 電子測(cè)量?jī)x器 力學(xué)儀器儀表 木材水分分析 電磁輻射檢測(cè)儀 臺(tái)灣衡欣AZ 香港,AR 深圳市富蘭克電子有限公司 友情鏈接: 富蘭克電子有限公司:http://www.flk1718.com富蘭克電子:http://www.flkaz.com環(huán)保檢測(cè):http://www.hbjc17.com;電子儀器:http://www.flkelec.com;儀器儀表:http://www.zh1718.com;臺(tái)灣衡欣儀器:http://www.azflk.com/; 富蘭克電子阿儀網(wǎng):http://show.app17.com/C1519/
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
檢測(cè)方法: ELISA酶聯(lián)免疫法
說(shuō) 明 書(shū):隨貨發(fā)送,也可直接聯(lián)系在線銷(xiāo)售索取
測(cè)試種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、牛、羊、豬、雞、鴨elisa試劑盒等種屬
檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
試劑盒保存及有效期:2-8℃,避光保存:6個(gè)月。
產(chǎn)品產(chǎn)地:進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
產(chǎn)品庫(kù)存:
品牌:自主研發(fā)/進(jìn)口原裝
產(chǎn)品價(jià)格:價(jià)格優(yōu)惠,歡迎來(lái)電洽談!
試劑盒使用范圍:僅供科研檢測(cè),不得用于臨床.
產(chǎn)品價(jià)格:價(jià)格優(yōu)惠,歡迎來(lái)電洽談!
ELISA試劑盒定性定量檢測(cè)一步到位,可同時(shí)大批量完成多種屬的檢測(cè)工作,而且一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,正規(guī)專(zhuān)業(yè)的我們,一定能幫您,將實(shí)驗(yàn)做得更好,更精確。試驗(yàn)過(guò)程中,如有任何疑問(wèn)都可和我們聯(lián)系,無(wú)論是售前、售中、售后我們都將始終如一,將優(yōu)質(zhì)服務(wù)進(jìn)行到底。
供應(yīng)商:上海繁旌生物科技有限公司
上海繁旌生物ELISA試劑盒獨(dú)特優(yōu)勢(shì):
1、采用全進(jìn)口原料和抗體:高效、靈敏、特異,嚴(yán)格引進(jìn)國(guó)際技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行批量生產(chǎn)。
2、先進(jìn)的優(yōu)化方案:重復(fù)性高,可靠性。
3、技術(shù)服務(wù):專(zhuān)業(yè),及時(shí),耐心。
4、現(xiàn)貨供應(yīng):江浙滬隔天到貨,外地3-5天到貨。
ELISA試劑盒技術(shù)原理:
(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。
(2). 結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。
(3). 酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。
(4). 受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。
(5). 此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。測(cè)定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復(fù)性好。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。
ELISA試劑盒操作步驟:
1、包被過(guò)程(注意設(shè)置空白對(duì)照,陰性對(duì)照):
將所用抗原用包被稀釋液稀釋到適當(dāng)濃度(一般所需抗原包被量為每孔20-200μg),每孔抗原加入100μl,置37℃,4h,或4℃,24h;棄去孔中液體.(為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋或?qū)迤椒旁诘撞坑袧窦啿嫉慕饘贊窈兄?/span>)
2、封閉酶標(biāo)反應(yīng)孔:
5%小牛血清置37℃封閉40min.封閉時(shí)將封閉液加滿(mǎn)各反應(yīng)孔,并去除各孔中的氣泡,封閉結(jié)束后用洗滌液滿(mǎn)孔洗滌3遍,每遍3min.
洗滌方法:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,將洗滌液注滿(mǎn)板孔,放置2min略作搖動(dòng),吸干孔內(nèi)液,傾去液體后在吸水紙上拍干
洗滌次數(shù)3次
3、加入待檢測(cè)樣品(建立合適的濃度梯度):
檢測(cè)時(shí)一般采用1:50-1:400的稀釋度,應(yīng)采用較大稀釋體積進(jìn)行,一般保證樣品吸取量>20μl.
將稀釋好的樣品加入酶標(biāo)反應(yīng)孔中,每樣品至少加雙孔,每孔100μl,置于37℃,40-60min.用洗滌液滿(mǎn)孔洗滌3遍,每遍3min.
4、加入酶標(biāo)抗體:
酶標(biāo)抗體:根據(jù)酶結(jié)合物提供商提供的參考工作稀釋度進(jìn)行.37℃,30-60min之間.短于30min往往結(jié)果不穩(wěn)定.每孔加100μl.洗滌同前.
5、加入底物液(現(xiàn)用現(xiàn)配):
首選TMB-過(guò)氧化氫尿素溶液,OPD-過(guò)氧化氫底物液系統(tǒng)次之.
底物加入量:每孔100μl,置37℃避光放置3-5分鐘,加入終止液顯色.
6、終止反應(yīng):
每孔加入終止液50μl終止反應(yīng),于20min內(nèi)測(cè)定實(shí)驗(yàn)結(jié)果.
7、結(jié)果判斷:
OPD顯色后采用492nm波長(zhǎng),TMB反應(yīng)產(chǎn)物檢測(cè)需要450nm波長(zhǎng).檢測(cè)時(shí)一定要首先進(jìn)行空白孔系統(tǒng)調(diào)零.用測(cè)定標(biāo)本孔的吸收值與一組陰性標(biāo)本測(cè)定孔平均值的比值(P/N)表示,當(dāng)P/N大于2時(shí)作為抗體的效價(jià).(數(shù)值的大小依具體檢測(cè)要求而定.)
人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒經(jīng)過(guò)嚴(yán)格交叉反應(yīng)和干擾測(cè)試及穩(wěn)定性試驗(yàn);明確的敏感度;針對(duì)所有樣品類(lèi)型達(dá)到的性能;廣泛的檢測(cè)范圍可以滿(mǎn)足大多數(shù)檢測(cè)要求;完善的售后服務(wù)和免費(fèi)的技術(shù)支持免去您的后顧之憂(yōu),凡購(gòu)買(mǎi)試劑盒者都可享受我公司相應(yīng)折扣優(yōu)惠,如有需要,可來(lái)電咨詢(xún)購(gòu)買(mǎi)!
關(guān)于ELISA試劑盒
ELISA試劑盒在國(guó)內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見(jiàn)的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等。
ELISA試劑盒自從60-70年代問(wèn)世以來(lái),得到全世界科研工作者的認(rèn)可及推崇,在歐美及中國(guó)獲得很大的推廣,尤其是國(guó)內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展。
Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測(cè)試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類(lèi)戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測(cè)。
免疫測(cè)定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),所以任何優(yōu)質(zhì)的診斷試劑離不開(kāi)優(yōu)質(zhì)的原料,如抗原抗體,酶等。以前用于免疫測(cè)定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動(dòng)物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過(guò)各種化學(xué)合成方法制備。近年來(lái),隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測(cè)定試劑幾成為現(xiàn)實(shí)的新一代試劑,各種新型使用的測(cè)定方法也不斷出現(xiàn)。
HBsAg試劑特點(diǎn)(檢測(cè)模式:臨床抗體夾心法):包被抗體為山羊多抗。多抗具有高親和性和對(duì)抗原各種表位的反應(yīng)性。酶表抗體為與HBsAg有不同結(jié)合位點(diǎn)的鼠復(fù)合單位,可測(cè)得HBsAg變異樣品,提高檢測(cè)的特異性(99.98%)提高檢測(cè)的靈敏度,應(yīng)用Parl Ehrich 學(xué)說(shuō)(PEI)HBsAg標(biāo)準(zhǔn)品,對(duì)ad標(biāo)準(zhǔn)品的靈敏度為0.05ng/ml對(duì)ay標(biāo)準(zhǔn)品靈敏度為0.025ng/ml
ELISA檢測(cè)試劑盒應(yīng)用定性?shī)A心免疫檢測(cè)技術(shù),用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國(guó)型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段,分別來(lái)自于該毒株的開(kāi)放閱讀框2和開(kāi)放閱讀框3。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗體,這些抗體就會(huì)與HEV 的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過(guò)氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結(jié)合物就會(huì)與第一次孵育結(jié)合上的HEV IgM抗體相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時(shí)會(huì)發(fā)生酶-底物反應(yīng),只有那些含有HEV IgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會(huì)發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng),并在波長(zhǎng): 450nm處測(cè)量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測(cè)試標(biāo)準(zhǔn), O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽(yáng)性。
LISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。
然而,影響Elisa試驗(yàn)結(jié)果的因素很多,故加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。
特點(diǎn):一、高效、靈敏、特異的抗體; 二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性; 三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體; 四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類(lèi)型; 五、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
elisa試劑盒回收率是反應(yīng)待測(cè)物在樣品分析過(guò)程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標(biāo)液1PPM,就是1毫克/升,而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說(shuō)你的回收率是99%,這個(gè)與真實(shí)成分有密切的關(guān)系,說(shuō)明方法的準(zhǔn)確度。比如水中總無(wú)機(jī)氯含量測(cè)定,樣品水中含有無(wú)機(jī)氯20mg/L,取100mL被測(cè)水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無(wú)機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)樣品,測(cè)定時(shí)忽略體積變化,如果測(cè)定出樣品中無(wú)機(jī)氯為2.98mg/L,則認(rèn)為回收率為99%。
安全性
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
4. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
5. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
6. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
7. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
9. 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
10. 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
11. 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
12. 按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
elisa試劑盒測(cè)試要求
做好對(duì)照
正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說(shuō)明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
實(shí)驗(yàn)條件的選擇
在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的最適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值最大而蛋白量最少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見(jiàn)酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無(wú)色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿(mǎn)意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
檢測(cè)范圍和靈敏度不同,用量少時(shí),可使用分裝,前期是它的長(zhǎng)久性不是很好。
試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線最高點(diǎn)OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。
試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)R≥0.98。
試劑盒重復(fù)性好,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<9 %。
試劑的組份都多給20%的富余量,確保完成48/96孔的檢測(cè),避免分次檢測(cè)可能造成試劑量不足的情況。
檢測(cè)抗體及酶結(jié)合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗(yàn)操作者準(zhǔn)確地做稀釋工作,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性
ELISA法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲(chóng)病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來(lái)測(cè)定抗體,而且也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大